- •3513 Практикум з мікробіології, вірусології та імунології
- •Частина 1 Загальна бактеріологія та імунологія
- •Передмова
- •Cписок скорочень
- •Правила роботи у бактеріологічній лабораторії. Морфологія бактерій. Світлова мікроскопія з використанням імерсійного об’єктива. Прості методи фарбування препаратів
- •Дeмонстрація
- •1. Бактеріологічний посуд: бактеріологічна петля (рис. 1д), чашка Петрі (рис. 1а), пробірки, градуйовані піпетки, колби
- •2. Предметні та покривні скельця (рис. 1б, в). Скельця з лунками. Спиртівка. Пісочний годинник, олівець “для скла”
- •3. Мікроскоп. Імерсійне масло
- •Правила роботи з імерсійною системою
- •Можливі помилки під час роботи з мікроскопом
- •Догляд за мікроскопом
- •Пояснення до самостійної роботи з теми:
- •Загальна будова навчального світлового мікроскопа
- •2. Будова бактеріальної клітини. Складні методи фарбування. Фарбування за методом Грама. Мікроскопічний метод діагностики збудників інфекційних захворювань
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «будова бактеріальної клітини. Складні методи фарбування. Фарбування за методом Грама. Мікроскопічний метод діагностики інфекційних захворювань»
- •Спори та методи їх виявлення
- •Капсула
- •Класифікація бактерій за кількістю і розташуванням джгутиків
- •Методи виявлення джгутиків у бактерій
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми
- •«Особливості ультраструктури спірохет,
- •Рикетсій, хламідій, мікоплазм.
- •Сучасні методи мікроскопічного дослідження»
- •Звивисті форми бактерій
- •Загальна схема будови Treponema pallidum
- •4. Основи асептики та антисептики. Дезінфекція. Стерилізація
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •3. Автоклав
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «основи асептики та антисептики. Дезінфекція. Стерилізація»
- •Види та завдання дезінфекції
- •Практична робота студентів
- •Пояснення до самостійної роботи з теми
- •«Фізіологія бактерій.
- •Перший етап бактеріологіного методу діагностики.
- •Біологічний метод діагностики»
- •Метаболізм
- •Конструктивний (анаболізм) Енергетичний (катаболізм)
- •6. Ріст та розмноження мікроорганізмів.
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «ріст та розмноження мікроорганізмів.
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «ііі – IV етап виділення чистої культури аеробних бактерій. Ферменти бактерій. Антибіотики»
- •8. Облігатні Анаероби. Виділення чистої культури
- •3. Метод Фортнера
- •4. Ріст Cl. Perfingens на середовищі Вільсон-Блера
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «облігатні Анаероби. Виділення чистої культури облігатних анаеробних бактерій»
- •V етап Врахування та аналіз результатів дослідження. Відповідь
- •9. Бактеріофаги. Генетика бактерій
- •Теоретичні питання
- •Практична робота студентів
- •Демонстрація
- •5 . Дослід із виявлення множинної стійкості мікроорганізмів до антибіотиків
- •2 Мл культури реципієнта (f-)
- •1 Мл бульйонної культури реципієнта
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «бактеріофаги та їх практичне використання. Генетика бактерій»
- •Бактеріофаги та їх практичне використання. Генетика бактерій
- •Перевага методу плр – полімеразної ланцюгової реакції для діагностики інфекційних захворювань
- •10. Нормальна мікрофлора тіла людини. Дисбактеріоз
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •3.1. Замалюйте мікроскопічні препарати.
- •3.2. Бакпечатка для вивчення мікрофлори тіла людини
- •3.3. Біологічні препарати (еубіотики): колібактерин, лактобактерин, біфідумбактерин, біфікол.
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «нормальна мікрофлора тіла людини. Дисбактеріоз. Вчення про інфекцію»
- •Дисбактеріоз
- •11. Вчення про інфекцію
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •1. Виявлення гемолітичної властивості бактерій
- •2. Виявлення плазмокоагулазної активності бактерій
- •4. Виявлення лецитовітелазної активності
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «нормальна мікрофлора тіла людини. Дисбактеріоз. Вчення про інфекцію»
- •12. Імунітет. Фактори і механізми вродженого захисту організму
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •2. Фагоцитоз у новонародженої і дорослої людини
- •3. Визначення бактерицидної активності сироватки крові
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «імунітет. Фактори і механізми вродженого захисту організму»
- •Особливості імунної системи
- •13. Антигени
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація Діагностичні препарати: Діагностикуми і антигени
- •Алергени для шкірноалергічних проб
- •Лікувально-профілактичні препарати
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «антигени»
- •Класифікація антигенів
- •Антигени – сторонні макромолекули
- •Інфекційні
- •14. Адаптивна гуморальна імунна відповідь. Імуноглобуліни (антитіла). Серологічні реакції флокуляції, нейтралізації
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •1. Імунні сироватки (антитоксичні) та імуноглобуліни
- •2. Титрування антитоксичної сироватки методом флокуляції
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «гуморальна імунна відповідь. Імуноглобуліни (антитіла). Серологічні реакції флокуляції, нейтралізації»
- •Набутий (адаптивний) імунітет
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •1. Реакція непрямої гемаглютинації (рнга)
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «серологічні реакції: реакція зв’язування комплементу (рзк), реакції з використанням мічених антитіл та антигенів – іфа, ріф, ріа»
- •16. Адаптивна клітинна імунна відповідь. Імунологічна толерантність. Регуляція імунної відповіді
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «адаптивна клітинна імунна відповідь. Імунологічна толерантність. Регуляція імунної відповіді»
- •Механізм цитотоксичної дії т-кілера на клітину-мішень
- •17. Оцінка імунного статусу людини. Принципи функціонування імунної системи
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «оцінка імунного статусу людини. Принципи функціонування імунної системи»
- •18. Протиінфекційний імунітет
- •Теоретичне питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «протиінфекційний імунітет»
- •Антигенспецифічна імунна відповідь
- •Зв’зок типу імунної відповіді з локалізацією інфекційних агентів
- •19. Патологія імунної системи
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «патологія імунної системи»
- •Типи алергічних реакцій
- •20. Специфічна профілактика та терапія інфекційних захворювань. Лікувальні, профілактичні та діагностичні імунологічні препарати
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Діагностичні препарати
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «специфічна профілактика і терапія інфекційних захворювань. Лікувальні, профілактичні та діагностичні імунологічні препарати»
- •Список рекомендованої літератури
- •Практикум з мікробіології, вірусології та імунології
- •Частина 1 Загальна бактеріологія та імунологія
Пояснення до самостійної роботи з теми «основи асептики та антисептики. Дезінфекція. Стерилізація»
Групи факторів зовнішнього середовища, що діють на мікроорганізм |
Фізичні, хімічні, біологічні |
Результати дії факторів зовнішнього середовища на мікроорганізми |
|
Варіанти знешкоджувальної дії факторів |
|
Умови, що визначають результат дії фактора |
|
Загальна характеристика фізичних та хімічних агентів |
До фізичних факторів, які мають негативний вплив на мікроорганізми, відносять високі температури, променеву енергію, ультразвук, речовини, що зменшують поверхневе натягнення. Під високими температурами розуміють діапазон температур вище 600 С, які мають стерилізувальнудію відносновегетативних та спорових форм мікробів. Променева енергія поширенау природі у вигляді електромагнітних хвиль різної довжини, що викликає різноманітні фізіологічні та біохімічні ефекти. Бактерицидну дію на мікроби мають ультрафіолетові промені (довжиною 2300 – 2800 Å) та іонізуюча радіація. До їх дії найбільш чутливі нуклеїнові кислоти. Ультразвукові (високочастотні) коливання в багатьох випадках руйнують мікробні клітини, але їх чутливість до ультразвуку може коливатися в широких діапазонах. Ультразвуком користуються для отримання антигенів із тканин та мікробних клітин та інших цілей. Речовини, які зменшують поверхневе натягнення (детергенти), затримують ріст, спороутворення бактерій. Висушування має бактерицидну дію на велику кількість мікроорганізмів. Але деякі з них стійкі до висушування, наприклад,спори збудника правця, сибірки. Деякі хімічні сполуки мають бактерицидну та бактеріостатичну дію на мікроорганізми. Ці сполуки використовують у медичній практиці антисептики для дезінфекції різних матеріалів, приміщень тощо. Вибір антисептика та його дози залежить від матеріалу, що підлягає дезінфекції |
Мікробоциди |
Речовини, які вбивають мікроорганізми: бактеріоциди, фунгіциди, спороциди, альгіциди вірулоциди |
Бактеріостатики та фунгістатики (мікробостатики) |
Речовини, що пригнічують ріст та розмноження мікроорганізмів |
Класифікація атимікробних речовин залежно від мети використання |
|
Антисептики (визначення) |
Речовини, що викликають загибель широкого кола мікроорганізмів або запобігають їх розмноженню в/на тканинах організму |
Дезінфектанти (визначення) |
Речовини, що знешкоджують мікроорганізмів в/на об’єктах зовнішнього середовища |
Консерванти (визначення) |
Речовини, що запобігають розмноженню мікроорганізмів у харчових продуктах, косметичних засобах та інших об’єктах |
Загальна характеристика антимікробних речовин |
Для антибіотиків та хіміотерапевтичних препаратів характерна специфічність та вибірковість дії. Антисептики та дезінфектанти, як правило, мають неспецифічну дію |
Дезінфекція (визначення) |
Знешкодження патогенних та умовно патогенних мікроорганізмів в об'єктах зовнішнього середовища з використанням переважно хімічних речовин – дезінфектантів |
Основна причина проведення дезінфекції |
Знешкодження збудника інфекційного захворювання на предметах зовнішнього середовища, які використовуються у роботі з хворим |
Методи дезінфекції |
1.Фізичні. 2.Механічні (витряхування, провітрювання, вологе прибирання та ін.); дія високої температури (кип’ятіння, пастеризація та ін.); дія УФВ (опромінення бактерицидними лампами). 3.Хімічні методи (використання дезінфекційних засобів: хлоровмісних препаратів, окисників, фенолів, йоду, спиртів, формальдегідів, кислот, альдегідів) |
Вимоги до дезінфектантів |
|
Пастеризація (визначення) |
Знешкодження вегетативних форм патогенних та гнильнихмікроорганізмів у продуктах харчування шляхом прогрівання останніх при температурах нижче 90 ○С |
Антисептика (визначення) |
Знешкодження патогенних мікроорганізмів на поверхні тіла людини та у рані з використанням хімічних речовин – антисептиків |
Різновиди антисептики |
|
Асептика (визначення) |
Система заходів, що запобігають внесенню (потраплянню) мікроорганізмівіз навколишнього середовища в тканини або порожнини людського організму при лікувальних та діагностичних маніпуляціях, а також у матеріал для дослідження, в поживні середовища та культури мікроорганізмів при лабораторних дослідженнях |
Стерилізація (визначення) |
Знешкодження всіх форм життя в об'єктах зовнішнього середовища з використанням переважно фізичних факторів (автоклавування, кип'ятіння, фільтрування та ін.) |
Методи стерилізації |
1. Фізичні методи стерилізації: а) термічна стерилізація високими температурами (асептичний метод); б) променева стерилізація ультрафіолетовим випроміненням; в) механічна стерилізація (фільтраційний метод). 2. Хімічні методи стерилізації. 3. Біологічна (додавання антибіотиків у поживні середовища) |
Фізичні методи стерилізації |
1. Прокалювання. Таким способом зазвичай стерилізують дрібний інструментарій (бактеріологічні петлі, голки, пінцети тощо), предметні та покривні скельця. 2. Кип׳ятіння. 3.Стерилізація сухим жаром. Проводиться у сухожаровій шафі (пічі Пастера) при нагріванні повітря до температури 165 – 180 °С та стерилізації матеріалу впродовж60 – 45 хвилин. При більш високій температурі відбувається обвуглення паперу, у який загорнутий посуд, а при більш низькій температурінеобхіднийбільший термін стерилізації. Сухим жаром стерилізують скляний посуд – пробірки, чашки Петрі, піпетки тощо. 4. Стерилізація парою під тиском. Це один із найбільш ефективних методів стерилізації,що грунтуєтьсяна сильній гідролізуючій дії насиченої пари. Проводиться в автоклаві. 5. Стерилізація проточною парою – при температурі 100 °С використовується у тих випадках, коли матеріал не витримує високої температури (наприклад, поживні середовища, молоко, желатин, деякі вуглеводи). Стерилізацію проточною парою проводять у автоклаві при відкритому випускному крані та незачиненій кришці або в апараті Коха при 100 °С. Для повного знезараження використовують принцип багаторазової стерилізації, тобто стерилізують матеріал при 100 °С (або 80 – 90 °С)упродовж30 – 40 хвилинупродовж 3 діб (вегетативні форми гинуть, а спори зберігаються та проростають при кімнатній температурі; таке трикратне прогрівання забезпечує достатньо надійну стерильність матеріалу). 6. Тиндалізація – це багаторазова стерилізація матеріалу при 56 – 58 °С упродовж 1години 5 днів поспіль. Використовується для стерилізації речовин, що легко руйнуються (сироватки, вітаміни тощо). 7. Пастеризація – не повна стерилізація при температурі 65 – 80 °Супродовж10 – 60 хвилин. Спрямована на знешкодження неспорових мікроорганізмів. Використовується для стерилізації харчових продуктів (вино, пиво, молоко, соки тощо). 8. Стерилізація ультрафіолетовими променями використовується для стерилізації повітря в мікробіологічних лабораторіях, боксах, операційних і т. п. Використовують бактерицидні лампи різної потужності |
Механічна стерилізація |
Проводиться за допомогою дрібнопористих фільтрів різних типів, які затримують лише клітинні форми мікроорганізмів та їх спори. Фільтруванням стерилізують рідкі матеріали, які не витримують нагрівання (сироватки, розчини антибіотиків тощо). Фільтрування також використовується для отримання бактеріальних токсинів, фагів та різних продуктів життєдіяльності бактерій |
Хімічні методи стерилізації |
Стерилізація об’єктів, які не витримують високої температури (наприклад, ендоскопи) |