- •3513 Практикум з мікробіології, вірусології та імунології
- •Частина 1 Загальна бактеріологія та імунологія
- •Передмова
- •Cписок скорочень
- •Правила роботи у бактеріологічній лабораторії. Морфологія бактерій. Світлова мікроскопія з використанням імерсійного об’єктива. Прості методи фарбування препаратів
- •Дeмонстрація
- •1. Бактеріологічний посуд: бактеріологічна петля (рис. 1д), чашка Петрі (рис. 1а), пробірки, градуйовані піпетки, колби
- •2. Предметні та покривні скельця (рис. 1б, в). Скельця з лунками. Спиртівка. Пісочний годинник, олівець “для скла”
- •3. Мікроскоп. Імерсійне масло
- •Правила роботи з імерсійною системою
- •Можливі помилки під час роботи з мікроскопом
- •Догляд за мікроскопом
- •Пояснення до самостійної роботи з теми:
- •Загальна будова навчального світлового мікроскопа
- •2. Будова бактеріальної клітини. Складні методи фарбування. Фарбування за методом Грама. Мікроскопічний метод діагностики збудників інфекційних захворювань
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «будова бактеріальної клітини. Складні методи фарбування. Фарбування за методом Грама. Мікроскопічний метод діагностики інфекційних захворювань»
- •Спори та методи їх виявлення
- •Капсула
- •Класифікація бактерій за кількістю і розташуванням джгутиків
- •Методи виявлення джгутиків у бактерій
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми
- •«Особливості ультраструктури спірохет,
- •Рикетсій, хламідій, мікоплазм.
- •Сучасні методи мікроскопічного дослідження»
- •Звивисті форми бактерій
- •Загальна схема будови Treponema pallidum
- •4. Основи асептики та антисептики. Дезінфекція. Стерилізація
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •3. Автоклав
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «основи асептики та антисептики. Дезінфекція. Стерилізація»
- •Види та завдання дезінфекції
- •Практична робота студентів
- •Пояснення до самостійної роботи з теми
- •«Фізіологія бактерій.
- •Перший етап бактеріологіного методу діагностики.
- •Біологічний метод діагностики»
- •Метаболізм
- •Конструктивний (анаболізм) Енергетичний (катаболізм)
- •6. Ріст та розмноження мікроорганізмів.
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «ріст та розмноження мікроорганізмів.
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «ііі – IV етап виділення чистої культури аеробних бактерій. Ферменти бактерій. Антибіотики»
- •8. Облігатні Анаероби. Виділення чистої культури
- •3. Метод Фортнера
- •4. Ріст Cl. Perfingens на середовищі Вільсон-Блера
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «облігатні Анаероби. Виділення чистої культури облігатних анаеробних бактерій»
- •V етап Врахування та аналіз результатів дослідження. Відповідь
- •9. Бактеріофаги. Генетика бактерій
- •Теоретичні питання
- •Практична робота студентів
- •Демонстрація
- •5 . Дослід із виявлення множинної стійкості мікроорганізмів до антибіотиків
- •2 Мл культури реципієнта (f-)
- •1 Мл бульйонної культури реципієнта
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «бактеріофаги та їх практичне використання. Генетика бактерій»
- •Бактеріофаги та їх практичне використання. Генетика бактерій
- •Перевага методу плр – полімеразної ланцюгової реакції для діагностики інфекційних захворювань
- •10. Нормальна мікрофлора тіла людини. Дисбактеріоз
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •3.1. Замалюйте мікроскопічні препарати.
- •3.2. Бакпечатка для вивчення мікрофлори тіла людини
- •3.3. Біологічні препарати (еубіотики): колібактерин, лактобактерин, біфідумбактерин, біфікол.
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «нормальна мікрофлора тіла людини. Дисбактеріоз. Вчення про інфекцію»
- •Дисбактеріоз
- •11. Вчення про інфекцію
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •1. Виявлення гемолітичної властивості бактерій
- •2. Виявлення плазмокоагулазної активності бактерій
- •4. Виявлення лецитовітелазної активності
- •Демонстрація
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «нормальна мікрофлора тіла людини. Дисбактеріоз. Вчення про інфекцію»
- •12. Імунітет. Фактори і механізми вродженого захисту організму
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •2. Фагоцитоз у новонародженої і дорослої людини
- •3. Визначення бактерицидної активності сироватки крові
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «імунітет. Фактори і механізми вродженого захисту організму»
- •Особливості імунної системи
- •13. Антигени
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація Діагностичні препарати: Діагностикуми і антигени
- •Алергени для шкірноалергічних проб
- •Лікувально-профілактичні препарати
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «антигени»
- •Класифікація антигенів
- •Антигени – сторонні макромолекули
- •Інфекційні
- •14. Адаптивна гуморальна імунна відповідь. Імуноглобуліни (антитіла). Серологічні реакції флокуляції, нейтралізації
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •1. Імунні сироватки (антитоксичні) та імуноглобуліни
- •2. Титрування антитоксичної сироватки методом флокуляції
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «гуморальна імунна відповідь. Імуноглобуліни (антитіла). Серологічні реакції флокуляції, нейтралізації»
- •Набутий (адаптивний) імунітет
- •Практична робота
- •Демонстрація
- •1. Реакція непрямої гемаглютинації (рнга)
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «серологічні реакції: реакція зв’язування комплементу (рзк), реакції з використанням мічених антитіл та антигенів – іфа, ріф, ріа»
- •16. Адаптивна клітинна імунна відповідь. Імунологічна толерантність. Регуляція імунної відповіді
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «адаптивна клітинна імунна відповідь. Імунологічна толерантність. Регуляція імунної відповіді»
- •Механізм цитотоксичної дії т-кілера на клітину-мішень
- •17. Оцінка імунного статусу людини. Принципи функціонування імунної системи
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «оцінка імунного статусу людини. Принципи функціонування імунної системи»
- •18. Протиінфекційний імунітет
- •Теоретичне питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «протиінфекційний імунітет»
- •Антигенспецифічна імунна відповідь
- •Зв’зок типу імунної відповіді з локалізацією інфекційних агентів
- •19. Патологія імунної системи
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «патологія імунної системи»
- •Типи алергічних реакцій
- •20. Специфічна профілактика та терапія інфекційних захворювань. Лікувальні, профілактичні та діагностичні імунологічні препарати
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Діагностичні препарати
- •Пояснення до самостійної роботи з теми «специфічна профілактика і терапія інфекційних захворювань. Лікувальні, профілактичні та діагностичні імунологічні препарати»
- •Список рекомендованої літератури
- •Практикум з мікробіології, вірусології та імунології
- •Частина 1 Загальна бактеріологія та імунологія
Пояснення до самостійної роботи з теми «імунітет. Фактори і механізми вродженого захисту організму»
Імунітет (визначення) |
Динамічний стан організму, при якому комплекс уроджених і адапивних, гуморальних і клітинних факторів і реакцій забезпечує постійність (сталість) внутрішнього середовища (гомеостаз) організму |
Форми імунітету |
Вроджений (видовий) і адаптивний (набутий) |
Форми набутого імунітету |
1. Природний (активний і пасивний). 2. Штучний (активний і пасивний) |
Механізми імунітету |
3. Патофізіологічні |
Вроджені механізми клітинного імунітету |
1. Бактерицидність шкіри і слизових оболонок.
5. Клітинна ареактивність |
Природні кілери (NK) |
Великі гранулярні лімфоцити, які не мають маркерів Т- і В-лімфоцитів. Здійснюють швидкий цитоліз сторонніх клітин на основі лектинового розпізнання. Є важливими факторами протипухлинного та противірусного захисту |
Механізм дії природних кілерів
|
Тісний контак. Токсична дія на клітини-мішені: а) пухлинні; б) вірусовмісні. Загибель клітин у результаті активації механізмів апоптозу |
Види фагоцитозу
|
Завершений. Незавершений. Імунний |
Показники оцінки фагоцитозу |
|
Гуморальні фактори вродженого імунітету |
1. Система комплементу (С1 – С9). 2. Система інтерферонів (α, β, γ). 3. Цитокіни, які продукуються моноцитами і макрофагами (ІЛ-1, ФНПα, ІЛ-6, хемокіни). 4. Білки гострої фази запалення. 5. Ейкозаноїди. 6. Пропердин. 7. Лізоцим |
Система комплементу |
Комплемент – це комплекс білків сироватки крові, які реагують між собою в певній послідовності та забезпечують участь антигенів, антитіл у клітинних та гуморальних реакціях імунітету. Відкритий комплемент французьким ученим Ж. Борде. Комплемент складається з 20 різних за фізико-хімічними властивостями білків сироватки крові, його позначають символом «С», а дев’ять основних компонентів комплементу — цифрами: С1, С2, ... С9. Кожний компонент має субодиниці, які утворюються при розчепленні. Білки комплементу є глобулінами або глікопротеїнами, продукуються макрофагами, нейтрофілами та становлять 5–10 % усіх білків сироватки крові |
Механізм дії та функції комплементу |
Комплемент виконує різноманітні функції і є одним із головних компонентів імунної системи. В організмі комплемент знаходиться у неактивному стані та активується в момент утворення комплекса антиген — антитіло. Після активації його дія має каскадний характер та є серією протеолітичних реакцій, спрямованих на посилення імунних та клітинних реакцій та активацію дії антитіл на знищення антигенів. Існує три шляхи активації комплементу: класичний, альтернативний та лектиновий. Класичний шлях здійснюється за участі антитіл. При цьому способі активації відбувається приєднання до комплексу антиген – антитіло (АГ + AT) спочатку компонента С1, потім до утвореного комплексу АГ + AT + С1 приєднуються послідовно «ранні» компоненти комплементу С4, С2, СЗ. Вони активують за допомогою ферментів компонент С5, причому реакція відбувається без участі комплексу АГ + AT. Компонент С5 прикріпляється до мембрани клітини і на ньому утворюється літичний комплекс із «пізніх» компонентів комплементу С5b, С6, С7, С8, С9. Цей комплекс називається мембраноатакуючим, оскільки він здійснює лізис клітини. Альтернативний шлях активації комплементу відбувається без участі антитіл і розпочинається з активації компоненту СЗ, яка може відбуватися в результаті прямої дії антигену. Активований компонент СЗ взаємодіє з факторами В і D (ферментами) системи комплементу та білком пропердином (Р). Утворений комплекс активує компонент С5, на якому формується мембраноатакуючий комплекс без участі компонентів С1, С2, С4 |
Система інтерферонів |
Інтерферон – білок із противірусною, протипухлинною та імуномодулюючою дією, продукується багатьма клітинами у відповідь на проникнення вірусу або складних біополімерів. Інтерферон гетерогененний за своїм складом, його молекулярна маса коливається від 15 до 70 кД. Родина інтерферонів містить більше 20 білків, які відрізняються за фізико-хімічними властивостями. Усі вони об’єднані в три групи за джерелом походження: α, β, γ. α-інтерферон виробляється лейкоцитами крові, тому його називають лейкоцитарним. β-інтерферон отримують при інфікуванні вірусами культури клітин фібробластів людини; його називають фібробластним γ-інтерферон отримують з імунних Т-лімфоцитів, сенсибілізованих антигенами, тому його називають імунним. Інтерферони мають видову специфічність і противірусну, антипроліферативну та імуномодулюючу дію. Інтерферон, абсорбуючись на поверхні клітини або проникаючи всередину, діє на геном клітини хазяїна та впливає на процеси репродукції віруса чи проліферацію клітини. Дія інтерферону в основному профілактична, але його використовують і з лікувальною метою |
Білки гострої фази (БГФ) |
1. С-реактивний білок. 2. Фібриноген. 3. Манозозв'язуючий білок. 4. Сироватковий амілоїдний протеїн Функція БГФ пов'язана з запаленням і вилученням патогенів із організму |
Цитокіни |
Медіатори міжклітинної комунікації при імунній відповіді, гемопоезі, запаленні. Діють на основі рецепторного механізму. До цитокінів належать інтерлейкіни, хемокіни, інтерферони, фактори некрозу пухлин, колонієстимулювальні фактори. Визначають з діагностичною метою, використовують як імунотерапевтичні засоби |
Природні антитіла |
Антитіла, які завжди наявні в сироватці крові та спрямовані проти еритроцитарних антигенів груп крові, проти ентеробактерій, коків та деяких вірусів. Ці антитіла постійно продукуються в організмі людини без будь-якої антигенної стимуляції |
Ейкозаноїди |
Активні продукти метаболізму арахідонової кислоти (лейкотрієни, простагландини) |
Фактори набутого, адаптивного імунітету |
При гуморальній імунній відповіді – антитіла проти конкретних антигенів, збудників. При клітинній імунній відповіді – Т-кілери (цитотоксичні), Тh-лімфоцити (Th1), активовані макрофаги |
Перша лінія захисту організму |
Гуморальні і клітинні фактори вродженого імунітету, які зумовлюють захист організму від патогенів до утворення адапивних факторів гуморального і клітинного імунітету |
Імунодіагностика |
Система діагностичних лабораторних методів, які ґрунтуються на імунних реакціях та використовуються для визначення молекул антитіл або антигенів (серодіагностика та сероідентифікація). Проведення внутрішньошкірних алергічних проб (визначення сенсибілізованих лімфоцитів) |
Імунотерапія |
Методи лікування інфекційних та неінфекційних захворювань, спрямовані на зв’язування антигенів та нормалізацію порушень імунної системи за допомогою імунологічних засобів (імунних сироваток, імуноглобулінів, імуностимуляторів або імуносупресантів) |
Імунопрофілактика |
Система специфічних та неспецифічних імунологічних засобів, спрямованих у більшості випадків на стимуляцію імунної відповіді за допомогою вакцин та інших препаратів із метою запобігання захворюванням |
Які структури мікроорганізмів розпізнаються факторами вродженого імунітету |
Toll-подібні рецептори (TLR) є мембранними та внутрішньоклітинними лектиновими та іншими патернасоційованими утвореннями, які розпізнаються вродженими факторами |