Cd28 (т-клетка)

_I

Усиление

_1_

экспрессии CD154 (Т-клетка) секреции IL-4 дифференцировки Тп2-клеток

(Т-клетка)

Усиление экспрессии с080 (в-клетка)

к представлению В7 (CD80) на В-клетках. Связывание же CD28 увеличивает представление CD154 на Т-клетках и, что особенно важно, усиливает секрецию IL-4 и дифференциров­ку Тп2-клеток. IL-4 в свою очередь увеличивает выраженность представления В7 (CD80) на В-клетках (схема 3.2).

Таким образом, взаимодействие CD28 и В7 (CD80) может усиливать и секрецию IL-4, и СО40-опосредованную актива­цию В-клеток и тем самым потенцировать оба обязательных сигнала, необходимых для индукции синтеза IgE. В согласии с этим представлением находятся данные о том, что моно-клональные анти-С028-антитела подавляют синтез IgE, осу­ществляемый в присутствии 1L-4 и преактивированного клона Т-клеток.

Значительное увеличение представительства В7 (CD80) возможно также и при перекрестном связывании молекул II класса МНС на В-клетках. Это усиление особенно выражено при одновременном связывании ICAM-1.

Слабый IgE-индуцирующий сигнал, обеспечиваемый свя­зыванием LFA-3 (CD58) с CD2, по-видимому, не зависит от механизма, опосредуемого CD40.

Из сказанного следует предположение о том, что те клет­ки, которые, во-первых, способны синтезировать IL-4 (и/или IL-13) и, во-вторых, могут представлять CD154, при опреде­ленных обстоятельствах замещают функцию Т-клеток в ин­дукции синтеза IgE. Наиболее вероятными кандидатами на исполнение такой роли могут быть тучные клетки и базофилы. Эти клетки человека способны при активации секретировать IL-4 (и IL-13) и представлять CD154. Поэтому они в принципе могли бы обеспечивать оба необходимых сигнала для синтеза IgE. Действительно, при определенных экспериментальных

Ю— 1385

145

условиях показана способность этих клеток индуцировать синтез IgE. Однако наиболее вероятно участие этих клеток не в первичной индукции IgE-ответа, а в его усилении. Это сле­дует из того, что интенсивная активация клеток и соответст­венно секреция IL-4 осуществляются IgE-зависимым механиз­мом. Иными словами, для вовлечения тучных клеток и базо­филов в регуляцию синтеза IgE требуется присутствие в орга­низме аллергенспецифического IgE и соответствующего ал­лергена. Если же это условие соблюдено, то вероятно, что при очередной аллергенной стимуляции тучных клеток и базофи­лов они могут потенцировать IgE-ответ на тот же самый ал­лерген. Правда, нельзя исключить и того, что в случае поступ­ления в организм в этот период новых аллергенов тучные клетки и базофилы могут стать соучастниками индукции IgE-ответа на новые аллергены. Такая вероятность могла бы объ­яснить хорошо известный феномен постепенного расширения спектра повышенной чувствительности к разным аллергенам у пациентов с аллергическими заболеваниями.

Сравнительно давно было показано, что одним из эффек­тов IL-4 может быть увеличение выраженности представления на некоторых клетках низкоаффинного рецептора для IgE. Этот вид рецептора в отличие от высокоаффинного рецептора для IgE, присутствующего на тучных клетках, базофилах и не­которых других клетках, обозначается как рецептор второго типа — Fee RII (CD23). До последнего времени появляются сведения, которые заставляют признать участие CD23 в регу­ляции синтеза IgE.

CD23 является дифференцировочным антигеном В-кле­ток, несущих поверхностные иммуноглобулины М и D. Этот антиген представляет собой сиалогликопротеин с мол. массой порядка 45 кДа, содержит одну N-связанную углеводную цепь комплексного типа. Его аминокислотная последовательность выведена из последовательности клонированной ДНК. Рецеп­тор состоит из 320 аминокислотных остатков. Положение его в клеточной мембране необычно. Аминоконцевой участок ориентирован внутрь клетки, а карбоксильный — наружу. Ре­цептор состоит из небольшого цитоплазматического домена (23 аминокислотных остатка), трансмембранного домена (20 аминокислотных остатков) и большого внеклеточного до­мена (277 аминокислотных остатков). CD23 описан на многих клетках, включая В-клетки, моноциты, эозинофилы, тромбо­циты, эпидермальные клетки Лангерганса.

Особенным свойством этого белка является способность к аутопротеолитическому перевариванию. За счет этого ре­цептор распадается на растворимые фрагменты с мол. массой 37; 33; 25—27 и 12 кДа. Все эти фрагменты (за исключением последнего) связывают IgE (IgE-связывающие факторы — IgE-СФ).

Известно два подтипа низкоаффинного рецептора для IgE — CD23a и CD23b. Они отличаются друг от друга несколь­кими аминокислотными остатками цитоплазматического до­мена, а внеклеточные домены являются идентичными. CD23a выявляется лишь на нестимулированных В-клетках, а CD23b — на В-клетках, стимулированных IL-4, а также на мо­ноцитах, эозинофилах, Т-клетках.

Регуляция выраженности представления CD23 и соответ­ственно регуляция образования IgE-СФ связаны между собой: чем больше представлен рецептор, тем более вероятно образо­вание растворимых IgE-СФ.

Представление CD23 индуцируется IL-4 и подавляется IFN-cc. IFN-y тормозит представление CD23 на В-клетках, но не на моноцитах, тромбоцитах, клетках Лангерганса. Повы­шенное присутствие CD23 обнаруживается при некоторых па­тологических состояниях, для которых характерно усиление образования IgE: при острых аллергических заболеваниях, при паразитарных инфекциях.

Вполне вероятно, что CD23 выполняет различные функ­ции и спектр участия этой молекулы в иммунологически опо­средованных реакциях может быть шире, чем сейчас представ­ляется. Во всяком случае, связанный с мембраной CD23 опо­средует IgE-зависимую цитотоксичность, направленную про­тив паразитов и выполняемую эозинофилами, макрофагами, тромбоцитами. Кроме функций, обусловленных сродством к IgE, рецептор может исполнять роль молекулы клеточной адгезии за счет своих лектиноподобных свойств. У лектиново-го домена CD23 обнаружена гомология с семейством молекул клеточной адгезии (ELAM1, GMP 140).

В прямых испытаниях показано, что высокоочищенный естественный IgE-СФ или рекомбинантный IgE-СФ с мол. массой 37 кДа усиливает IL-4-опосредованный синтез IgE. Ве­роятнее всего, что IgE-СФ, не индуцируя синтез IgE, действу­ет на более поздний этап продукции IgE, чем IL-4, — иными словами, на активированные IL-4 IgE-секретирующие клетки. CD23 взаимодействует главным образом с CD21 на тех В-клетках, которые преимущественно осуществляют продукцию IgE. Антитела к CD23 тормозят in vitro IL-4-опосредованный синтез IgE и антигенспецифический IgE-ответ изотипспеци-фическим образом. На секретирующих IgE-клетках CD23 не представлен. Поэтому тормозящий эффект антител к CD23 на возникший синтез IgE опосредуется, по-видимому, не пря­мым действием на секретирующие иммуноглобулин клетки, а нейтрализацией растворимых IgE-СФ, которые высвобожда­ются из IgM/IgD-несущих В-клеток, стимулированных IL-4, или из моноцитов.

Поддержание синтеза IgE на определенном уровне может зависеть и от действия других лимфокинов. Так, синтез IgE

человека, вызванный IL-4, усиливается IL-5 и IL-6. Для до­стижения оптимального уровня продукции IgE, видимо, необ­ходим IL-6, так как антитела именно к IL-6 существенно по­давляют секрецию IgE.

Возникший синтез IgE поддерживается на определенном уровне и за счет других факторов, которые могут оказывать сдерживающее влияние на синтез IgE. IFN-cc, как правило, подавляет продукцию IgE и IgE-СФ клетками, стимулирован­ными IL-4. В испытаниях на мышах IFN-y как в условиях in vivo, так и на клетках in vitro тормозит продукцию IgE. Данные на человеческом материале не столь однозначны. IFN-y как подавляет, так и усиливает вызванный IL-4 синтез IgE клетка­ми человека, что может быть связано с невыясненными осо­бенностями условий испытаний. В отдельных наблюдениях, выполненных на больных, страдающих аллергией, показано, что введение таким больным IFN-y не оказывало заметного влияния на уровень IgE в сыворотке крови. Таким образом, пока нельзя сделать окончательное заключения о роли IFN-y в регуляции синтеза IgE у человека.

В модельных же опытах на животных показано, что уро­вень продукции IgE зависит от соотношения образующихся IL-4 и IFN-y. Последнее в свою очередь определяется пре­имущественной активацией клеток, продуцирующих IL-4 или IFN-y. У мышей эти лимфокины образуются разными клет­ками: Thl-клетки продуцируют IFN-y, а также IL-2 и лимфо-токсин, а Тг12-клетки — IL-4 и IL-5, но не IL-2 и IFN-y. У человека хелперные Т-клетки не могут быть подразделены на два аналогичных типа. Большинство клеток, продуцирую­щих IL-4, образуют одновременно либо IFN-y, либо IL-2, или оба этих медиатора. И все же некоторые сведения о вза­имоотношении IFN-y и IL-4 в продукции IgE могут быть по­лучены на клеточных системах человека in vitro. Стимуляция аллогенными клетками вызывает продукцию IFN-y в клеточ­ной культуре. Как и следует ожидать, такая культура клеток не продуцирует IgE. Если же в нее в самом начале культиви­рования внести IL-4, то удается вызвать синтез IgE и пода­вить образование IFN-y.

Высвобождаемый активированными макрофагами IL-12 тормозит синтез IgE, по-видимому, за счет усиления продук­ции IFN-y и частично — за счет угнетения продукции IL-4, о чем будет сказано далее.

Известно, что связывание с лигандом молекулы CD 14 на моноцитах активирует эти клетки и дает отрицательный сиг­нал, останавливающий пролиферацию Т-клеток. Вместе с тем есть данные, свидетельствующие о том, что связывание с ли­гандом CD 14 может реализоваться действием непосредствен­но на В-клетки. Так, связывание определенных эпитопов CD14 моноклональными антителами тормозит IL-4-зависи­

мый синтез IgE мононуклеарными клетками периферической крови человека. Такое торможение не связано ни с высвобож­дением тормозных монокинов (IL-10, TGF-p, простагланди-нов), ни с угнетением накопления усиливающих IgE-ответ факторов. Кроме того, торможение продукции IgE, вызванное связыванием CD 14, воспроизводится на обедненной Т-клет-ками клеточной взвеси, стимулированной IL-4 и анти-СО-40 моноклональными антителами или IL-4 и гидрокортизоном. Взятые вместе, эти данные позволяют допустить, что лигация (связывание с лигандом) CD 14 оказывает сдерживающее регу-ляторное действие непосредственно на В-клетки.

Пока точно не установлены ни временные параметры вы­свобождения усиливающих и тормозных посредников, ни конкретные точки приложения их действия, ни их взаимная связь в ходе IgE^oTBeTa, но уже стало очевидным, что выясне­ние всех этих вопросов может объяснить механизм удержания продукции IgE на определенном уровне. Примеры потенци­альных взаимодействий и молекул — участников механизма индукции, усиления или торможения образования IgE приве­дены в табл. 3.3.

Т аб л и ц а 3.3. Взаимодействия и молекулы, запускаю щие, тормозящие или усиливающие синтез IgE

Взаимодействия/факторы	Функция
Антиген (пептид) в комплексе	Индукция переключения
с МНС II класса	на синтез IgE в В-клет-
TCR/CD3	ках
CD40/CD154
IL-4
IL-13
IFN-y	Торможение синтеза IgE
IFN-a	В-клетками
TGF-P
IL-8
IL-12
Моновалентный sCD23/CD21
PGE2
PAF
IL-2	Усиление синтеза IgE
IL-5	В-клетками
IL-6
IL-9
CD23/CD21
CD80/CD28?