77.Бруцели, їх властивості. Загальна характеристика захворювання. Фармакологічні препа­рати для діагностики, лікування та профілактики.

Бруцели є збудниками бруцельозу – гострого або хронічного антропозоонозних інфекційного захворювання, яке характеризується інтоксикацією, переважним ураженням опорно-рухового апарату, нервової, серцево-судинної, сечостатевої систем та інших органів, аллергизацией організму, затяжним перебігом, що призводить, як правило, до інвалідизації.

Збудники бруцельозу відносяться до роду Brucella з неясним систематичним положенням, який включає в себе наступні види: B. melitensis, B. abortus, B. suis, B. ovis, B. canis, B. neotomae, що відносяться до II групи патогенності. Назва роду пов’язане з ім’ям Д. Брюса, який відкрив в 1886 р збудника бруцельозу.

Морфологія. Бруцели – дрібні грамнегативні мікроби (0,4-0,6×0,5-3 мкм) кулястої, овоидной або паличкоподібні форми. Суперечка не утворюють, нерухомі. При дії специфічного бактеріофага або при культивуванні на середовищі з 10% імунною сироваткою утворюють ніжну капсулу. Здатні утворювати стабільні і нестабільні L-форми.

Таксономія: Збудники бруцельозу B.melitensis, B.abortus, B.suis, B.canis, B.ovis відносяться до відділу Gracilicutes, роду Brucella.

Морфологічні та тинкторіальних властивості: Дрібні, грамнегативні палички овоидной форми. Не мають суперечку, джгутиків, іноді утворюють мікрокапсулу.

Культуральні властивості: облігатні аероби. B.abortus для свого зростання потребує присутності 5-10% вуглекислого газу. Оптимальними для росту є температура 37С. Вимогливі до живильних середовищ і ростуть на спеціальних середовищах (печінкових, кров'яний агар). Їх особливістю є повільний (протягом 2 тижнів) зростання. У рідких середовищах - рівномірне помутніння з невеликим осадом. На щільних - дрібні, круглі гладкі блакитні колонії. Дисоціація від S- до R-форм колоній.

Біохімічна активність: дуже низька; містять каталазу і оксидазу, нітрати редуцируют в нітрити, цитрати Забороняється кидати, продукують Н2S.

Антигенна структура. O-антиген - соматичний, і капсульний антигени. Два різновиди О-антигену - А (абортусів) і М (мелітензіс). Іноді виявляють К-антиген.

Фактори патогенності: Утворюють ендотоксин, що володіє високою інвазивної активністю. Продукують один з ферментів агресії - гіалуронідазу. Їх адгезивні властивості пов'язані з білками зовнішньої мембрани.

Резистентність. Швидко гинуть при кип'ятінні, при дії дезінфікуючих речовин, стійкі до низької температури: в замороженому м'ясі вони зберігаються до 5 міс, в молочних продуктах - до 1,5 міс.

Епідеміологія. Зоонозних інфекція. Джерело - велика і дрібна рогата худоба, свині, вівці, які виділяють B.melitensis. Люди більш сприйнятливі до цього виду збудника. Рідше зараження відбувається від корів (B.abortus) і свиней (B.suis). Хворі люди не є джерелом захворювання.

Патогенез. Проникають в організм через слизові оболонки або пошкоджену шкіру, потрапляють спочатку в регіонарні лімфатичні вузли, потім в кров, розносяться по всьому організму і впроваджуються в органи ретикулоендотеліальної системи (печінку, селезінку, кістковий мозок). Там вони можуть тривалий час зберігатися і знову потрапляти в кров. При загибелі звільняється ендотоксин, що викликає інтоксикацію.

Клініка: Інкубаційний період складає зазвичай 1-3 тижнів. Тривала лихоманка, озноб, пітливість, болі в суглобах, радикуліти.

Імунітет: Після перенесеного захворювання формується неміцний імунітет. Клітинно-гуморальний, нестерильний, відносний.

Лабораторна діагностика:

Лабораторна діагностика зазвичай проводиться шляхом серологічних досліджень (реакція Райта і Хеддлсона).

Бактеріологічне дослідження. Для отримання гемокультури кров засівають в два флакони печінкового бульйону. Один з них (для виділення культури В. melitensis) інкубують в звичайних аеробних умовах, інший (для виділення первинної культури В. abortus) -з СО2. У перших генераціях бруцели ростуть дуже повільно. На агарі бруцели утворюють безбарвні колонії, в бульйоні - помутніння і слизистий осад. У мазках, пофарбованих за Грамом, виявляються дрібні грамнегативні форми. Вони нерухомі, спор не утворюють, в певних умовах з'являється видима капсула.

Для швидкої ідентифікації бруцел ставлять реакцію аглютинації зі специфічними аглютинативна сироватками на склі і визначають чутливість до специфічного фагу. Всі види бруцел не ферментує вуглеводи. Їх диференціюють за освітою H2S, чутливості до СО2, дії анілінових барвників (основний фуксин).

Серодиагностика. Реакція аглютинації Райта з бруцеллезним діагностикумів. Позитивні результати спостерігаються через 1 тиждень. після початку захворювання і зберігаються у перехворілих багато років. Діагностичний титр реакції 1: 200. Для прискореної серодиагностики застосовується реакція аглютинації Хеддлсона, яка ставиться з нерозведеної сироваткою хворого і концентрованим антигеном - діагностикумів, пофарбованим метиленовим синім. При позитивній реакції з'являються пластівці синього кольору. Реакція позитивна при наявності аглютинації на «++».

Для серодиагностики використовують РПГА, РІФ, РСК, метод визначення неповних антитіл. У пізні періоди захворювання відсоток позитивних серологічних реакцій (аглютинації, РПГА і РСК) починає знижуватися і більше діагностичне значення набувають шкірно-алергічна проба і реакція Кумбса.

Біопроба. Застосовується для виділення чистої культури з матеріалу, забрудненого сторонньої мікрофлорою. Досліджуваний матеріал вводять морським свинкам підшкірно в пахову область. Шматочки органів та лімфатичних вузлів засівають на поживні середовища для отримання чистої культури і її ідентифікації.

Шкірно-алергічна проба (реакція Бюрне). На передпліччі під шкіру вводять 0,1 мл бруцеліну. При наявності алергії вже через 6 ч. Можуть з'явитися гіперемія шкіри і хвороблива набряклість. Облік реакції проводять через 24 ч. Реакція має високу чутливість.

Лікування: Антибіотики широкого спектра дії. Специфічна імунотерапія убитої лікувальної бруцельозній вакциною або бруцеліну (фільтрат бульйонних культур В. melitensis, B.abortus, В.suis, убитих нагріванням. При гострих формах - бруцеллезний імуноглобулін.

Профілактика: Жива бруцеллезная вакцина отримана штаму ВА-19А, отриману з В. abortus, створює перехресний імунітет проти інших видів бруцел.

Бруцеллезний єдиний діагностикумів. Суспензія вбитих бруцел, забарвлених метиленовим синім, застосовується при серологічної діагностиці бруцельозу постановкою реакції аглютинації Райта і Хеддлсона.

Нашкірних суха жива бруцеллезная профілактична вакцина. Суспензія вакцинного штаму. В. abortus застосовується для профілактики бруцельозу.

78.Вірус гепатиту В. Структура віріону. Механізм зараження,Особливості патогенезу. Фармакологічні препарати для діагностики, лікування та профілактики. Засоби та шляхи запобігання захворювання у фармацевтичній справі.

Вірус гепатиту B належить до роду Orthohepadnavirus, до якого належать ще три інші види: вірус гепатиту ховрахів, вірус гепатиту бабаків, та вірус гепатиту B шерстистих мавп. Рід є частиною родини Hepadnaviridae, яка містить два інші роди, Avihepadnavirus та інший, який ще не описали. Ряд цієї родини вірусів поки що не визначили. Віруси схожі на вірус гепатиту B знаходили у всіх мавп старого світу (орангутангів, гіббонів, горил та шимпанзе) і вшерстистої мавпи нового світу, що припускає давнє походження цього вірусу в приматів.

Цей вірус поділяється на три головні серотипи (adr, adw, ayr, ayw) які побудовані на антигенних епітопах що знаходяться білках його оболонки, і на вісім генотипів (A-H) залежно від загальної варіації нуклеотидів в геномі. Генотипи мають різне географічне поширешння і використовуються при відслідковуванні еволюції та поширення вірусу. Відмінності в генотипі впливають на гостроту захворювання, його перебіг та ймовірність ускладнень, і на реакцію на лікування та вакцинацію.

Крім спричинення гепатиту B, зараження HBV може призводити до цирозу та гепатоцеллюлярної карциноми.^[5]

Також припускається що він збільшує ризик раку підшлункової залози.

Вірус гепатиту В - сімейство Hepadnaviridae рід Orthohepadnavirus.

Морфологія: ДНК-содержаший вірус сферичної форми. Складається з серцевини, що складається з 180 білкових частинок, складових серцевинних НВс-антиген і ліпідсодержащіх оболонки, що містить поверхневий HBs-антиген. Усередині серцевини знаходяться ДНК, фермент ДНК-полімераза, що володіє ревертазной активністю, і кінцевий білок НВе-антиген.

Геном представлений двунітевой ДНК кільцевої форми.

Культуральні властивості. Чи не культивується на курячих ембріонах, не володіє гемолітичної і гемагглютинирующей активністю. ВГВ культивується тільки в культурі клітин.

Резистентність. Висока до факторів навколишнього середовища і дезінфікуючих речовин. Вірус стійкий до тривалого впливу кислого середовища, УФ-випромінювання, дії спирту, фенолу.

Антигенна структура. Складна. У суперкапсиду вірусу знаходиться HBs-антиген, який локалізований в гідрофільній шарі на поверх-ності віріона. У формуванні HBs-антигену беруть участь 3 поліпептиду в глікозильованого формі: preSl - великий поліпептид; preS2 - середній поліпептид; S - малий поліпептид.

Епідеміологія: Розвиток інфекційного процесу при попаданні в кров. Зараження відбувається при парентеральних маніпуляціях (ін'єкції, хірургічних втручаннях), переливанні крові.

Патогенез і клініка захворювання. Інкубаційний період 3-6 місяців. Інфекційний процес настає після проникнення вірусу в кров. ВГВ з крові ендоцитозу проникає в гепатоцит. Після проникнення вірусу відбувається добудовування плюс-нитки ДНК ДНК-полімеразою до повноцінної структури. Клінічна картина характеризується симптомами ураження печінки, в більшості випадків супроводжується розвитком жовтяниці.

Імунітет. Гуморальний імунітет, представлений антитілами до HBs-антигену, захищає гепатоцити від вірусу, елімінуючи його з крові.

Клітинний імунітет звільняє організм від інфікованих гепатоцитів завдяки цитолітичної функції Т-кілерів. Перехід гострої форми в хронічну забезпечується порушенням Т-клітинного імунітету.

Лабораторна діагностика. Використовують серологічний метод і ПЛР. Методами ІФА і РНГА в крові визначають маркери гепатиту В: антигени і антитіла. ПЛР визначають наявність вірусної ДНК в крові і біоптатах печінки. Для гострого гепатиту ха¬рактерно виявлення HBs антигену, НВе антигену і анти-HBc-IgM антитіла.

Лікування. Використання інтерферону, интерфероногенов: віферона, аміксину, інгібітору ДНК-полімерази, препарату аденінрібонозіда.

Профілактика. Виняток потрапляння вірусу при парентеральних маніпуляціях і переливанні крові (застосуванням одноразових шприців, перевіркою на гепатит В за наявністю HBs-антигену в крові донорів крові).

Специфічна профілактика здійснюється вакцинацією рекомбінантної генно-інженерної вакциною, яка містить HBs-антиген. Вакцинації підлягають усі новонароджені в перші 24 години життя. Тривалість поствакцинального імунітету - не менше 7 років.