Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Лабораторный практикум по биологической химии.doc
Скачиваний:
161
Добавлен:
07.03.2016
Размер:
6.24 Mб
Скачать

Оформление работы

Отмечают принцип метода, ход работы, заносят в таблицу результаты анализа количества соляной кислоты и общей кислотности, отмечают клинико-диагностическое значение. Делают вывод о причинах выявленных нарушений.

Образец желудоч­ного сока

Количество 0,1М NaOH, мл

Соляная кислота, ммоль/л

Общая кислот­ность, ммоль/л

Пункт 1

Пункт 2

Пункт 3

своб-я

общая

связ-я

1

2

3

Лабораторная работа 3

Качественная реакция на молочную кислоту в желудочном соке

Принцип

Молочная кислота превращает фенолят железа (III) фиолетового цвета в малодиссоциирующую соль лактата железа желто-зеленого цвета.

Реактивы

1) 1% р-р фенола, 2) 1% р-р FeCl3, 3) 40% р-р молочной кислоты.

Материал исследования

Нормальный желудочный сок и желудочный сок с молочной кислотой.

Проведение анализа

Готовят раствор фенолята железа (III), смешивая 2,0 мл 1% раствора фенола с 3 каплями 1% раствора FeCl3.

Разливают смесь в 4 пробирки:

  • в первую по каплям вносят раствор молочной кислоты,

  • в остальные – образец нормального желудочного сока и патологического желудочного сока с молочной кислотой.

При наличии молочной кислоты фиолетовая окраска раствора заменяется желто-зеленой.

Нормальные величины

Молочная кислота

отсутствие

Клинико-диагностическое значение

Накопление молочной, масляной, уксусной кислот в желудке происходит в результате гипо- и ахлоргидрии или ахилии из-за отсутствия защитной функции соляной кислоты. Развивается застой пищевой кашицы и брожение компонентов пищи микроорганизмами.

Оформление работы

Указывают принцип метода, ход работы, нормальные величины и результаты исследования, отмечают клинико-диагностическое значение показателя и делают выводы о возможных причинах изменений.

Окраска раствора

Наличие молочной кислоты

Р-р молочной кислоты

Нормальный желудочный сок

Желудочный сок с лактатом

Лабораторная работа 4

Обнаружение крови и гемоглобина в желудочном соке с помощью диагностических полосок "Гемофан"

Принцип

Зона индикации диагностических полосок "Гемофан" содержит стабилизированную органическую гидроперекись, кислотный буфер и хромоген. При наличии крови в исследуемой жидкости гемоглобин, обладающий ферментативной пероксидазной активностью, катализирует окисление хромогена гидроперекисью с образованием продуктов синего цвета. В присутствии свободного (растворенного) гемоглобина зона индикации окрашивается в синий цвет равномерно, при наличии эритроцитов на светлом фоне видны яркие синие точки.

Материал исследования

Нормальный желудочный сок и желудочный сок с кровью.

Проведение анализа

В каждый образец исследуемого желудочного сока погружают индикационную зону диагностической полоски, быстро вынимают и через 30 секунд сравнивают с цветной шкалой на этикетке. По шкале сравнения на упаковке тест‑полосок определяют концентрацию гемоглобина и количество эритроцитов.

Нормальные величины

Кровь

отсутствие

Клинико-диагностическое значение

Кровотечение в полость желудка наблюдается при гастрите, изъязвлении стенок желудка, злокачественных опухолях. При этом под действием соляной кислоты кровь преобразуется в гематин темно-коричневого цвета, напоминающий кофейную гущу, обнаруживаемый либо при зондировании, либо окрашивающий кал в черный цвет. Кровоточивость десен также может давать положительный результат.

Свежая кровь в кале может появляться в результате травмы или кровотечения в тонком кишечнике или прямой кишке.

Оформление работы

Указывают принцип метода, ход работы, нормальные величины и результаты исследования, отмечают клинико-диагностическое значение показателя и делают выводы о возможной патологии.

Лабораторная работа 5 (теоретически)

Беззондовый метод определения кислотности желудочного сока (ацидотест)

Метод беззондового определения кислотности желудочного сока удобен, надежен, щадит больного. Рекомендуется при противопоказаниях к фракционному зондированию (гипертоническая болезнь, невропатии), а также у детей младшего возраста.

Принцип

Введенный per osкраситель (2,4-диамино-4-этоксиазо­бензол) в желудке при наличии и под действием свободной соляной кислоты (pH3) освобождается из драже и всасывается. Через 1,5 часа в моче определяют количество красителя. При подкислении мочи 25% раствором HCl образуется солянокислая соль красителя красного цвета. Степень окраски мочи (количество красителя) прямо пропорционально кислотности желудочного сока. Сопоставление окраски со шкалой служит количественным показателем кислотности.

Реактивы

1) 25% р-р соляной кислоты, 2) драже красителя 2,4-диамино-4‑этоксиазобензола, 3) таблетки кофеинбензоата натрия.

Материал исследования

"Контрольная" порция мочи и собранная через 1,5 часа после приема красителя.

Проведение анализа

Подготовка пациента: после голодания в течение 8 часов и опорожнения мочевого пузыря пациент принимает кофеинбензоат натрия (в 100 мл воды), стимулирующего желудочную секрецию и диурез.

Через 1 час собирают "контрольную" мочу. После этого пациент, не разжевывая, проглатывает драже красителя и через 1,5 часа снова собирают мочу.

Анализ проводят одновременно с обеими порциями мочи: доводят водой до 200 мл, отбирают по 5 мл разбавленной мочи, добавляют по 5 мл 25% р-ра HCl и сравнивают со шкалой.