Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Лабораторный практикум по биологической химии.doc
Скачиваний:
161
Добавлен:
07.03.2016
Размер:
6.24 Mб
Скачать

Темы для реферативных сообщений

  1. Гипераммониемии: причины, патогенез, клинические проявления, основы лечения. Гипераммониемия новорожденных. Молекулярные механизмы токсичности аммиака.

Лабораторная работа 1

Определение содержания мочевины в сыворотке крови и моче

Принцип

Мочевина в кислой среде при нагревании образует с диацетилмонооксимом в присутствии тиосемикарбазида и солей железа комплекс красного или розово-красного цвета. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию мочевины.

Реактивы

1) Рабочий реактив: смесь FeCl3, диацетилмонооксима, тиосемикарбазида, ортофосфорной кислоты и конц. H2SO4.

Стандартный раствор мочевины (16,65 ммоль/л).

Материал исследования

Сыворотка крови, моча (разведение 1:50).

Проведение анализа

Работа выполняется под тягой!

Опыт 1,

мл

Опыт 2,

мл

Стандарт,

мл

Сыворотка крови

0,01

––

––

Моча (разведение 1:50)

––

0,01

––

Стандартный раствор мочевины

––

––

0,01

Рабочий реактив

2,0

2,0

2,0

Перемешивают. Закрывают крышкой из фольги. Помещают под тягу, выдерживают 20 минут в кипящей водяной бане и охлаждают под проточной водой.

Измеряют оптическую плотность проб против воды при 540 нм (зеленый светофильтр) не позже чем через 15 минут после охлаждения.

Расчет

Концентрация мочевины сыворотки, ммоль/л =

Концентрация мочевины мочи, ммоль/сут = , где

Еопи Ест– оптическая плотность опытной и стандартной проб, Сст– концентрация мочевины в стандартной пробе, 50 – разведение мочи, Д – величина диуреза (1300-1500 мл/сут).

Нормальные величины

Сыворотка крови

дети

1,8‑6,4 ммоль/л

взрослые

2,5‑8,3 ммоль/л

Моча

330‑580 ммоль/сут

Клинико-диагностическое значение

Уровень мочевины в сыворотке крови и моче зависит от скорости ее синтеза в печени и выделения через почки, от величины и направленности белкового обмена.

Сыворотка крови

Повышение уровня мочевины в крови наблюдается при заболеваниях почек (нарушении выделительной функции), нарушении почечной перфузии (застойная сердечная недостаточность), истощении запасов воды в организме при рвоте, поносах (относительное повышение концентрации), при повышенном катаболизме белка (лихорадки, голодание), при диете с высоким содержанием белка.

Снижение концентрации отмечается при диете с низким содержанием белка, при повышенной утилизации белка в тканях (дети, поздние сроки беременности), тяжелых заболеваниях печени, сопровождающихся нарушением синтеза мочевины (паренхиматозная желтуха, гепатиты, цирроз печени).

Моча

Определение мочевины в моче позволяет следить за состоянием процессов анаболизма и катаболизма белков в организме (азотистый баланс).

Повышение концентрации мочевины в моче наблюдается при отрицательном азотистом балансе, при избыточном белковом питании, в послеоперационный период, при гиперфункции щитовидной железы, при лихорадке, голодании.

Уменьшение выделения мочевины свидетельствует о положительном азотистом балансе и наблюдается во время беременности, в период роста.