Темы для реферативных сообщений

1. Использование липидов в качестве лекарственных препаратов и биологически активных добавок (эссенциале, лецитин, холевая кислота, ‑3-жирные кислоты и др.).

2. Ненасыщенные и полиненасыщенные жирные кислоты. Типы, структурная роль, участие в метаболизме и поведенческих реакциях.

3. Липосомы в медицине. Строение и характеристика липосом. Возможность использования для транспорта лекарственных средств в крови.

4. Гликолипиды, структура липидных и углеводных компонентов. Функции гликолипидов. Нарушение обмена гликолипидов.

Лабораторная работа 1

Исследование влияния желчи на активность липазы поджелудочной железы

Принцип

В присутствии желчи степень эмульгирования жиров возрастает. Под действием фермента липазы эмульгированные триацилглицеролы молока гидролизуются. Количество образовавшихся жирных кислот определяют при помощи титрования раствором щелочи в присутствии фенолфталеина. Сравнивая результаты определения количества жирных кислот в присутствии и в отсутствии желчи, выявляют ее влияние на активность панкреатической липазы.

Материал исследования

Свежее молоко, панкреатин (источник липазы), раствор желчи (источник желчных кислот и фосфолипидов).

Реактивы

1) 0,1 М р-р NaOH, 2) 0,5% спиртовый р-р фенолфталеина.

Проведение анализа

	Контроль, мл	Опыт 1, мл	Опыт 2, мл
Молоко Дистил. вода Панкреатин Раствор желчи	1,0 3,0 –– ––	1,0 2,0 1,0 ––	1,0 1,0 1,0 1,0
	Инкубируют 15 минут при 37С
0,5% фенолфталеин	1-2 капли	1-2 капли	1-2 капли
0,1 М раствор NaOH	Титруют до слабо-розовой окраски, не исчезающей в течение 30 секунд

Результаты титрования фиксируют следующим образом:

V_К– количество мл щелочи, потраченной на титрование контрольной пробы. Показатель отражает исходное количество органических кислот, в том числе и жирных;

V₁– количество мл щелочи, потраченной на титрование опыта 1;

V₂– количество мл щелочи, потраченной на титрование опыта 2.

Расчет

1. Количество жирных кислот, образовавшихся при ферментативном гидролизе жира молока без желчи:

X₁= V₁– V_K

2. Количество жирных кислот, образовавшихся при ферментативном гидролизе жира молока в присутствии желчи:

X₂= V₂– V_K

3. Рассчитывают степень влияния желчи на активность липазы:

Активация липазы, % =

Практическое значение

Определение активности липазы применяется в клинике после взятия кишечного сока с помощью зонда для установления причин патологии переваривания липидов. При отсутствии желчи процесс переваривания липидов резко нарушается.

В фармации метод исследования активности липазы необходим для контроля качества лекарственных препаратов (панкреатин, фестал и др.), содержащих этот фермент.

Оформление работы

Записывают принцип метода и ход работы. Расчитывают результаты и делают вывод о влиянии желчи на переваривание жиров молока.

Лабораторная работа 2

Качественная реакция на желчные кислоты (реакция Петтенкофера)

Принцип

При взаимодействии желчных кислот с оксиметилфурфуролом, образующимся из сахарозы под действием концентрированной серной кислоты, появляется красно-фиолетовое окрашивание.

Материал исследования

Раствор желчи (2:1)

Реактивы

1) 20% р-р сахарозы, 2) конц. H₂SO_4.

Проведение анализа

На сухое предметное стекло, под которое подложен лист белой бумаги, наносят 1 каплю желчи, 1 каплю 20% раствора сахарозы и перемешивают стеклянной палочкой. Не двигая стекло, рядом наносят 3 капли концентрированной H₂SO₄. Через 2-3 минуты на месте слияния капель наблюдается красная окраска, переходящая в красно-фиолетовую.

Оформление работы

Записывают принцип метода, ход работы и фиксируют результаты. Делают выводы о возможности использования данного метода для обнаружения желчных кислот.

Лабораторная работа 3

Исследование состава фосфатидилхолина

Принцип

Метод основан на гидролизе фосфатидилхолина (лецитина) яичного желтка при нагревании в растворе NaOHс последующим определением в гидролизате его структурных компонентов: жирных кислот, глицерола, холина, фосфорной кислоты.

Материал исследования

Сухой желток куриного яйца.

Реактивы

1) 10% р-р NaOH, 2) 10% р-рHCl, 3) конц.HNO₃, 4) молибденовый реактив, 5) 1% р-рCuSO₄.

Проведение анализа

1. Гидролиз фосфатидилхолина

Кусочек яичного желтка помещают в пробирку, добавляют 1-2 мл 10% раствора NaOH, кипятят в водяной бане 15 минут.

Открытие холина

Холин при нагревании в щелочной среде превращается в триметиламин N(CH3)3, который обнаруживается в конце гидролиза по запаху селедочного рассола

2. Гидролизат делят на 3 пробирки

Открытие жирных кислот	К гидролизату 1-й пробирки прибавляют по каплям 10% раствор HClдо появления хлопьевидной взвеси жирных кислот
Открытие фосфорной кислоты	Ко 2-й части гидролизата осторожно добавляют 5-7 капель концентрированной HNO3и по каплям молибденовый реактив до появления желтого осадка фосфомолибдата аммония. При необходимости нагревают в кипящей водяной бане. После охлаждения пробирки в струе воды фосфомолибдат аммония выпадает в осадок
Обнаружение глицерола	К 3-й части гидролизата добавляют 5 капель 10% раствора NaOHи 1 каплю 1% раствораCuSO4, перемешивают. Образуется хелатное соединение меди с глицеролом ярко-синего цвета