Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Лабораторный практикум по биологической химии.doc
Скачиваний:
161
Добавлен:
07.03.2016
Размер:
6.24 Mб
Скачать

Оформление работы

Указывают принцип метода, ход работы, нормальные величины и результаты исследования, отмечают клинико-диагностическое значение показателя и делают выводы о возможной патологии.

Лабораторная работа 2

Определение содержания креатинина в сыворотке крови и моче

Принцип

Креатинин в щелочной среде образует с пикриновой кислотой пикрат креатинина оранжевого цвета. Интенсивность окраски раствора пропорциональна концентрации креатинина в биологической жидкости.

Реактивы

1) 10% р-р NaOH; 2) насыщенный р-р пикриновой кислоты; 3) 10% р-р трихлоруксусной кислоты (ТХУ).

Стандартный раствор креатинина, 177 мкмоль/л.

Материал исследования

Сыворотка крови, моча (разведение 1:50).

Проведение анализа

Опыт 1,

мл

Опыт 2,

мл

Стандарт,

мл

Сыворотка крови

Дистил. вода

10% р-р ТХУ

0,5

1,0

0,5

––

––

––

––

––

––

Перемешивают, затем центрифугируют при 1500 об/мин или фильтруют, предварительно смочив фильтр дистиллированной водой

Фильтрат

Дистил. вода

1,0

––

––

0,5

––

0,5

Моча (разведение 1:50)

––

0,5

––

Стандартный р-р креатинина

––

––

0,5

10% р-р NaOH

0,5

0,5

0,5

Насыщенный р-р пикриновой кислоты

0,5

0,5

0,5

Перемешивают, через 20 минут измеряют оптическую плотность проб против воды при длине волны 540 нм (зеленый светофильтр).

Расчет

Концентрация креатинина сыворотки, мкмоль/л =

Концентрация креатинина мочи, мкмоль/сут = , где

Еопи Ест– оптическая плотность опытной и стандартной проб, Сст– концентрация креатинина в стандартной пробе, 2 – разведение сыворотки крови, 50 – разведение мочи, Д – величина диуреза (1300-1500 мл).

Нормальные величины

Сыворотка крови

дети до 1 года

дети от 1 года до 12 лет

18‑35 мкмоль/л

27‑62 мкмоль/л

женщины

44‑97 мкмоль/л

мужчины

52‑132 мкмоль/л

Моча

4,4‑17,7 ммоль/сут

Клинико‑диагностическое значение

Сыворотка крови

Концентрация креатинина в крови здоровых людей относительно постоянна и зависит от состояния мышечной массы.

Повышениеуровня креатинина в крови в 2-7 раз отмечается при острой почечной недостаточности, в особо тяжелых случаях – в 15-25 раз. Кроме того, выход креатинина из миоцитов в кровь выражен при гипертиреозе, сахарном диабете, мышечной дистрофии, обширных ожогах, при лихорадочных состояниях, частых внутримышечных инъекциях.

Уменьшениесодержания креатинина в крови диагностического значения не имеет.

Моча

Увеличениеконцентрации креатинина в моче наблюдают у лиц с повышенной физической активностью, с лихорадочными состояниями. Оно отмечается при выраженной недостаточности функции печени, при сахарном и несахарном диабете, при синдроме длительного раздавливания, острых инфекциях.

Снижениесодержания креатинина в моче обнаруживается при хроническом нефрите и других заболеваниях почек, при мышечной атрофии, лейкозах и голодании.