Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Лабораторный практикум по биологической химии.doc
Скачиваний:
161
Добавлен:
07.03.2016
Размер:
6.24 Mб
Скачать

Лабораторная работа 2

Количественное определение состава мочи

Материал исследования

Нормальная моча и образцы мочи N1, 2, 3.

Оборудование

Тест-полоски "Глюкофан", "Кетофан", "Диафан", "Альбуфан", "Пентафан", "Билифан", "Иктофан".

Проведение анализа

Не прикасаясь руками к зоне индикации, из пенала упаковки берут полоску и погружают на 1-2 секунды в исследуемую жидкость. Капли мочи удаляют, проведя полоской по краю сосуда. Полоски оставляют в горизонтальном положении. Через 1 минуту по цветной шкале на упаковке определяют концентрацию искомого вещества.

Определение глюкозы тест-полосками "Глюкофан"

Принцип

Принцип определения глюкозы основан на ферментной глюкозооксидазной реакции. Зона индикации пропитана растворами ферментов глюкозооксидазы, пероксидазы и красителем тетраметилбензидином. Глюкоза с помощью глюкозооксидазы окисляется кислородом воздуха до глюконовой кислоты с образованием перекиси водорода. Перекись водорода в присутствии фермента пероксидазы окисляет краситель, и происходит переход желтой окраски в зеленую.

Нормальные величины

Моча

Глюкоза

тест-полоски "Глюкофан"

проба отрицательна

другие методы

0,1-0,8 ммоль/л или 1-15 мг/100 мл (мг%)

Клинико-диагностическое значение

Уровень глюкозы в моче возрастает при всех случаях гипергликемии свыше 10 ммоль/л (почечного порога).

Глюкозурии могут быть физиологическими и патологическими.

К физиологическим относятся алиментарная глюкозурия, глюкозурия беременных и нейрогенная глюкозурия на почве стрессовых состояний.

Патологическая глюкозурия обнаруживается:

  • при гипергликемии – сахарный диабет, тиреотоксикоз, акромегалия, гиперплазия коры надпочечников, инфаркт миокарда, отравления морфином, фосфором, кровоизлияния во внутренние органы, острые инфекции и нервные заболевания;

  • при повреждениях почечных канальцев – пиело- и гломерулонефриты, токсические поражения почек, почечный диабет (семейная почечная глюкозурия), нефропатии.

Определение кетоновых тел тест-полосками "Кетофан"

Принцип

Тест основан на реакции Легаля (см. Тема 9.2. "Обнаружение кетоновых тел в моче"). Желтая зона индикации на полосках содержит щелочной буфер в смеси с нитропруссидом натрия, дающий с ацетоном и ацетоуксусной кислотой красное, вишневое или фиолетовое окрашивание. Проба более чувствительна к ацетоуксусной кислоте, чем к ацетону. С ‑гидроксимасляной кисло­той индикатор не реагирует. Таким образом, интенсивность окраски отражает только концентрацию ацетоуксусной кислоты в моче.

Нормальные величины

Моча

Кетоновые тела

тест-полоски "Кетофан"

проба отрицательна

другие методы

20-30 мг/сут

Клинико-диагностическое значение

Кетоновые тела в моче (кетонурия) появляются при кетонемии, которая возникает при голодании, сахарном диабете, при повышении концентрации жиромобилизующих гормонов в крови, при ацетонемических состояниях у детей.

Определение белка тест-полосками "Альбуфан"

Принцип

Тест основан на изменении цвета с желтого до зелено-голубого кислотно-основных индикаторов (тетрабромфенолового синего и эфира тетрабромфенолфталеина) под влиянием белков. Проба наиболее чувствительна к альбуминам, значительно менее чувствительна к глобулинам, мукопротеинам, гемоглобину. При сильно щелочном рН мочи проба может давать ложноположительные результаты.

Нормальные величины

Моча

Белок

Тест-полоски "Альбуфан"

проба отрицательна

Другие методы

10-140 мг/л

Клинико-диагностическое значение

Небольшое количество белка в суточной моче обнаруживается и у практически здоровых лиц, однако в разовой порции мочи такие концентрации обычными методами не выявляются. Часть этих белков сывороточного проис­хождения, другая часть является продуктом клеток мочевыводящих путей.

Принято подразделять протеинурию в зависимости от места возникновения:

  • преренальную, связанную с усиленным распадом белка тканей или выраженным гемолизом;

  • ренальную, обусловленную патологией клубочков или канальцев почек;

  • постренальную, связанную с воспалением мочевыводящих путей.