Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Лабораторный практикум по биологической химии.doc
Скачиваний:
161
Добавлен:
07.03.2016
Размер:
6.24 Mб
Скачать

Темы для реферативных сообщений

  1. Молекулярный механизм развития алкогольной интоксикации. Причины повышенной чувствительности детей к алкоголю. Хронический алкоголизм. Клинико-лабораторная диагностика.

  2. Алкогольдегидрогеназа, катализируемые реакции, субстраты. Участие в биохимических и физиологических процессах. Изоферменты.

Глюконеогенез и его значение в метаболизме плода и новорожденного. Гипогликемия новорожденных, критерии, причины возникновения.

Лабораторная работа 1

Глюкозооксидазный метод определения концентрации глюкозы в сыворотке крови и моче

Принцип

Глюкоза с помощью глюкозооксидазы окисляется до глюконовой кислоты с образованием пероксида водорода. Пероксид водорода в присутствии хлорфенола при участии фермента пероксидазы окисляет краситель 4‑аминоантипирин, превращая его в хинонимин, окрашенный продукт розово-малинового цвета. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию глюкозы и определяется фотоколориметрически.

Материал исследования

Сыворотка крови. Моча.

Реактивы

1) Рабочий реагент, содержащий фенол, глюкозооксидазу, пероксидазу, 4‑аминоантипирин в калиево‑фосфатном буфере.

Стандартный раствор глюкозы, 5,5 ммоль/л.

Проведение анализа

Опыт 1,

мл

Опыт 2,

мл

Стандарт,

мл

Сыворотка крови

0,02

––

––

Моча

––

0,02

––

Стандартный раствор глюкозы

––

––

0,02

Рабочий реагент

2,0

2,0

2,0

Инкубируют в течение 25 минут при 37°С.

Измеряют оптическую плотность против воды при длине волны 540 нм (зеленый светофильтр)

Расчет

Концентрация глюкозы, ммоль/л = , где

Еоп и Ест – оптическая плотность опытных и стандартной проб, Сст– концентрация стандартного раствора

Нормальные величины

Сыворотка крови

взрослые

3,3-5,8 ммоль/л

Моча

0,06‑0,83 ммоль/л

Клинико-диагностическое значение

Сыворотка крови

Увеличение содержания глюкозы в крови наблюдается как при физиологических, так и при патологических состояниях.

Физиологические гипергликемии

К физиологическим гипергликемиям относится алиментарная, возникающая при одномоментном приеме больших количеств легкоусвояемых углеводов – моно- и дисахаридов, инейрогенная, например, при стрессовых ситуациях в результате выброса в кровь больших количеств катехоламинов. Физиологические гипергликемии носят транзиторный характер и быстро проходят.

Патологические гипергликемии

Патологические гипергликемии, как правило, обусловлены нейроэндокринными расстройствами:

  • сахарный диабет, связанный с абсолютной или относительной инсулиновой недостаточностью,

  • заболевания гипофиза, сопровождающиеся повышенной секрецией в кровь соматотропина и кортикотропина (акромегалия, болезнь Иценко-Кушинга, опухоли гипофиза и др.),

  • опухоли мозгового слоя надпочечников, когда усилено образование катехоламинов (феохромоцитома),

  • опухоли коркового слоя надпочечников с усиленной продукцией глюкокортикоидов,

  • гиперфункция щитовидной железы, некоторые болезни печени (инфекционный гепатит, цирроз печени).

Снижение концентрации глюкозы в крови также может быть физиологическое и патологическое.

Физиологические гипогликемии

К физиологической гипогликемии относят избыточную секрецию в кровь инсулина в ответ на алиментарную гипергликемию; гипогликемию после тяжелой и длительной мышечной работы, при полном или частичном голодании. Гипогликемия может возникать у женщин в период лактации в результате усиленного поглощения глюкозы молочной железой. У новорожденных часто наблюдается гипогликемия, обусловленная резким прекращением поступления "материнской" глюкозы, незрелостью структуры печени и повышенной чувствительностью клеток к инсулину.

Патологические гипогликемии

Наблюдаются при гиперинсулинизме при гиперплазии ‑клеток островков Лангерганса (инсулинома, аденома и рак поджелудочной железы). Самая распространенная причина гипогликемий – передозировка инсулина. Кроме того гипогликемию вызывает недостаток гормона кортизола при гипофункции коры надпочечников (Аддисонова болезнь, опухоли надпочечников), гипофункции передней доли гипофиза (болезнь Симмондса), гипофункции щитовидной железы. Гипогликемия может возникать при токсических поражениях печени, гликогенозах, при заболеваниях почек вследствие глюкозурии.

Моча

См. ниже.