Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Лабораторный практикум по биологической химии.doc
Скачиваний:
161
Добавлен:
07.03.2016
Размер:
6.24 Mб
Скачать

Оформление работы

Указывают принцип метода, ход работы, нормальные величины и результаты исследования, отмечают клинико-диагностическое значение показателя и делают выводы о возможной патологии.

Лабораторная работа 2

Определение рН мочи

Принцип

Определение проводится с помощью индикаторной бумаги или диагностических полосок, имеющих тест-зону для определения рН. Зона индикации диагностических полосок содержит смешанный кислотно-основной индикатор с переходом оранжевой окраски в желтую и далее в зеленую до появления синего цвета в диапазоне рН 5,0-9,0.

Материал исследования

Моча.

Проведение анализа

Не прикасаясь руками к зоне индикации, из пенала упаковки берут полоску и погружают на 1-2 секунды в исследуемую мочу. Капли мочи удаляют, проведя полоской по краю сосуда. Полоски оставляют в горизонтальном положении. Через 1 минуту по цветной шкале на упаковке определяют величину рН.

Нормальные величины

Моча

5,0-6,5

Влияющие факторы

При преимущественно белковом питании реакция мочи кислая, при растительной диете – щелочная. Кислая реакция мочи обусловлена, прежде всего, ионами Н2РО4иNH4+, а щелочная – ионами НСО3.

Клинико-диагностическое значение

Резко кислая реакция мочи наблюдается при лихорадочных состояниях, сахарном диабете, голодании и т.д. Щелочная реакция мочи отмечается при циститах и пиелитах, сильной рвоте, введении бикарбоната натрия и употреблении щелочных минеральных вод.

Кислотность мочи определяет возможность образования тех или иных типов мочевых камней. Мочекислые камни (уратные) чаще всего образуются при рН ниже 5,5, оксалатные – при рН 5,5-6,0, кальций-фосфатные – при рН 7,0‑7,8.

Оформление работы

Указывают принцип метода, ход работы, нормальные величины и результаты исследования, отмечают клинико-диагностическое значение показателя и делают выводы о возможной патологии.

Лабораторная работа 3

Определение концентрации неорганических фосфатов в сыворотке крови и моче

Принцип

Фосфорная кислота сыворотки крови в кислой среде реагирует с ванадатом и молибдатом аммония с образованием фосфорно-ванадиево-молибде­новой кислоты желтого цвета. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации неорганического фосфора в пробе и определяется фотометрически.

Материал исследования

Сыворотка крови. Моча, разведение 1:5.

Реактивы

1) 10% трихлоуксусная кислота, 2) рабочий раствор, содержащий 1 ммоль/л аммония молибдата и 1 ммоль/л аммония ванадата.

Стандартный раствор KH2PO4, 2,5 ммоль/л.

Проведение анализа

Опыт 1,

мл

Опыт 2,

мл

Стандарт,

мл

Сыворотка

Моча, разведение 1:5

Стандартный раствор

Дист. вода

ТХУ

0,2

––

––

0,6

0,8

––

0,2

––

0,6

0,8

––

0,2

0,6

0,8

Через 5‑8 минут пробы фильтруют или центрифугируют 10 минут при 1500 об/мин

Супернатант

Рабочий раствор

0,8

1,0

0,8

1,0

0,8

1,0

Перемешивают. Через 20 минут измеряют оптическую плотность опытных проб и стандарта против воды при длине волны 670 нм (красный светофильтр)

Расчет

Концентрация фосфатов сыворотки, ммоль/л =

Концентрация фосфатов мочи, ммоль/сут = , где

ЕОП — оптическая плотность пробы, ЕСТ — оптическая плотность стандарта, ССТ— концентрация стандартного раствора, 5 – разведение мочи, Д – величина диуреза (1300-1500 мл/сут).