Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Лабораторный практикум по биологической химии.doc
Скачиваний:
161
Добавлен:
07.03.2016
Размер:
6.24 Mб
Скачать

Нормальные величины

Сыворотка крови

дети от 1 года до 3 лет

54-85 г/л

старшие дети и взрослые

65-85 г/л

Клинико-диагностическое значение

Изменения концентрации общего белка в крови могут иметь как абсолютный (истинный), так и относительный характер. Изменения абсолютного характера являются следствием колебаний содержания белка в крови. Относительные изменения зависят от объема крови, то есть наблюдаются при обезвоживании или гипергидратации.

Гиперпротеинемия

Истинноеповышение концентрации белка в крови чаще всего связано с увеличением фракции глобулинов. Встречается при острых инфекциях (увеличение синтеза белков острой фазы), при хронических инфекциях (за счет‑глобулинемии), при миеломной болезни, лимфогрануломатозе, саркоидозе.

Относительнаягиперпротеинемия вызывается потерями внутрисосудистой жидкости в результате профузных поносов (например, холере), усиленном потоотделении, неукротимой рвоте, несахарном диабете, тяжелых и обширных ожогах, генерализованных перитонитах.

Гипопротеинемия

Снижение концентрации белка в крови чаще всего связано с уменьшением фракции альбуминов крови.

Абсолютная(истинная) гипопротеинемия связана:

  • с недостаточным потреблением белка с пищей – заболевания желудочно-кишечного тракта, сужение пищевода при опухолях, полное или частичное голодание;

  • со снижением синтеза белка – несбалансированный аминокислотный состав пищи, хронические паренхиматозные гепатиты, интоксикации, злокачественные новообразования, лечение кортикостероидами;

  • с усиленным распадом белков – кахексия, тяжелые инфекции, длительные воспалительные процессы, лихорадочные состояния, тиреотоксикозы;

  • с потерей белка – нарушения проницаемости капиллярных стенок, кровоизлияния, ожоги, острые и хронические кровотечения, нефротический синдром.

Относительнаягипопротеинемия связана с нарушением водного баланса – гипергидратация при гиперальдостеронизме, при почечной недостаточности со снижением экскреции солей, при использовании для питья морской воды, при неадекватных инфузиях солевых растворов.

Оформление работы

Указывают принцип методов, ход работы, нормальные величины и результаты исследования биуретовым и рефрактометрическим методами, отмечают клинико-диагностическое значение показателя и делают выводы о возможной патологии.

Лабораторная работа 2

Определение содержания белка в моче

Материал исследования

Нормальная моча и моча с белком.

Реактивы

1) Конц. HNO3, 2) 20% р-р сульфосалициловой кислоты.

Полуколичественное определение методом Робертса-Стольникова

Принцип

Метод основан на реакции Геллера, заключающейся в том, что на границе концентрированной азотной кислоты и мочи при наличии белка происходит его коагуляция и появляется мутное белое колечко, толщина и быстрота появления которого зависят от количества белка.

Проведение анализа

Не касаясь стенок, на дно пробирки наливают около 1,0 мл конц.HNO3, осторожно наслаивают из пипетки 1,0 мл мочи. Появление тонкого белого кольца на границе двух жидкостей между 2-й и 3-й минутами указывает на наличие белка в концентрации примерно 0,033 г/л (33 мг/л).

Если кольцо появляется раньше 2 минут после наслаивания, мочу следует развести водой и провести повторное наслаивание уже разведенной мочи. Степень разведения мочи подбирают в зависимости от вида кольца, т.е. его ширины, компактности и времени появления. При нитевидном колечке достаточно разведения в 2 раза, при более широком кольце необходимо разведение в 5, 10 и более раз.

Разведение

Количество жидкости, мл

вода

моча

1 : 2

1 : 5

1 : 10

1 : 15

1 : 20

1 : 50

0,50

0,80

0,90

1,87

1,90

1,96

0,50

0,20

0,10

0,13

0,10

0,04

Путем последовательного разведения мочи и ее наслаивания на азотную кислоту достигают такого максимального разведения мочи, при котором еще появляется едва заметное колечко между 2-й и 3-й минутами. Это соответствует 0,033 г/л или 33 мг/л белка.

Расчет

Концентрация белка, мг/сут = , где

где 33 – минимально определяемое количество белка (мг/л), А – разведение мочи, Д – суточный диурез (1,2-1,5 л).

Нормальные величины

Моча

50-150 мг/сут

Клинико-диагностическое значение

См. ниже.

Проба с сульфосалициловой кислотой

Принцип

При добавлении сульфосалициловой кислоты к моче рН мочи снижается до 1,0-2,0. При этом белки образуют с анионом сульфосалицилата нерастворимые комплексы.

Проведение анализа

К 2,0 мл мочи добавляют 2-4 капли сульфосалициловой кислоты. При наличии белка в моче выпадает белый осадок.

Нормальные величины

Моча

отсутствие помутнения

Клинико-диагностическое значение

Небольшое количество белка в суточной моче присутствует и у вполне здоровых лиц, однако в разовой порции мочи такие концентрации обычными методами не выявляются. Часть этих белков сывороточного происхож­дения, другая часть является продуктом мочевыводящих путей.

Обнаружение в моче белков чаще всего свидетельствует о заболеваниях почек. Принято подразделять протеинурию в зависимости от места возникновения:

  • преренальную, связанную с усиленным распадом белков тканей или выраженным гемолизом;

  • ренальную, обусловленную патологией клубочков или канальцев почек;

  • постренальную, связанную с воспалением мочевыводящих путей.