Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Лабораторный практикум по биологической химии.doc
Скачиваний:
161
Добавлен:
07.03.2016
Размер:
6.24 Mб
Скачать

Темы для реферативных сообщений

  1. Структурные белки организма: кератин, коллаген, эластин. Особенности строения. Функции.

  2. Сократительные белки мышечной ткани: актин и миозин. Особенности строения. Функция.

Лабораторная работа 1

Выделение и анализ химического состава фосфопротеинов и гликопротеинов

Качественные реакции на небелковые компоненты используют для обнаружения сложных белков в различных объектах.

Реактивы

1) 1% р-р тимола в этиловом спирте, 2) 10% р-р NaOH, 3) молибденовый реактив, 4) конц. H2SO4, 5) 1% р-рCuSO4, 6) 10% р-рCH3COOH, 7) конц.CH3COOH.

Анализ химического состава фосфопротеинов

Материал исследования

Молоко.

Проведение анализа

К 2,0 мл молока приливают равный объем дистиллированной воды, перемешивают. Добавляют 2 капли конц. CH3COOH. При подкислении (pH4,7) молоко свертывается, т.е. происходит выпадение в осадок белка казеиногена. Полученный хлопьевидный осадок отфильтровывают.

Осадок на фильтре делят на две части: с одной частью проводят биуретовую реакцию, в другой определяют наличие фосфорной кислоты.

Молибденовая проба на фосфорную кислоту

Принцип

Присутствующая в осадке фосфорная кислота, взаимодействуя с молибденово-кислым аммонием в азотной кислоте, образует окрашенное в лимонно-желтый цвет комплексное соединение аммония фосфомолибдата.

Проведение реакции

Половину осадка снимают палочкой с фильтра в пробирку. Для выявления фосфора добавляют 20 капель молибденового реактива. Нагревают в кипящей водяной бане. После охлаждения пробирки в струе воды фосфомолибдат аммония выпадает в осадок.

Биуретовая реакция

Принцип

В щелочной среде образуется комплексное соединение с развитием розово-фиолетового или сине-фиолетового окрашивания.

Проведение реакции

К оставшейся на фильтре части осадка добавляют 10 капель 10% р-ра NaOH и 1 каплю 1% р-ра CuSO4.

Анализ химического состава гликопротеинов Материал исследования

Слюна, собранная после ополаскивания рта водой.

Проведение анализа

В 2 пробирки собирают по 1 мл слюны, по каплям приливают конц. уксусную кислоту до появления сгустка муцина.

Реакция Молиша на углеводные группы

Принцип

После дегидратации пентоз серной кислотой образуется гидроксиметилфурфурол. При конденсации тимола с гидроксиметилфурфуролом развивается красное окрашивание, которое проявляется в виде розового кольца в пробирке.

Проведение реакции

Из 1-й пробирки жидкость сливают и к сгустку добавляют 2-3 капли р-ра тимола. Перемешивают и осторожно по стенке добавляют конц. H2SO4.

Биуретовая реакция

Принцип

В щелочной среде образуется комплексное соединение с развитием розово-фиолетового или сине-фиолетового окрашивания.

Проведение реакции

В другую пробирку предварительно добавляют 10 капель 10% р-ра NaOH для нейтрализации кислоты. Затем добавляют еще 10 капель 10% р-ра NaOH и 1 каплю 1% р-ра CuSO4.

Оформление работы

Отмечается ход работы, результаты заносятся в таблицу. Делается вывод о наличии в составе сложных белков обнаруживаемого компонента.

Объект иссл-я

Сложные белки

Выявляемый компонент

Окрашивание

Вывод о присутствии

Слюна

Гликопротеины

Белок

Углеводы

Молоко

Фосфопротеины

Белок

Фосфорная кислота