Оформление работы

Указывают принцип метода, ход работы, нормальные величины и результаты исследования, отмечают клинико-диагностическое значение показателя и делают выводы о возможной патологии.

Лабораторная работа 2

Полуколичественное определение концентрации глюкозы в моче по Альтгаузену

Реактивы

1) 0,5%, 1%, 2%, 3% р-ры глюкозы, 2) 10% р-р NaOH.

Принцип

Глюкоза при кипячении в щелочной среде превращается в окрашенные продукты окисления (от желтого до темно-коричневого цвета). Интенсивность окраски прямо пропорциональна содержанию глюкозы.

Материал исследования

Моча нормальная и моча с глюкозой.

Проведение анализа

	Контроль, мл	Опыт 1, мл	Опыт 2, мл
Дистил. вода Моча нормальная Моча с глюкозой 10% р-р NaOH	4,0 –– –– 1,0	–– 4,0 –– 1,0	–– –– 4,0 1,0
	Помещают в кипящую водяную баню одновременно с калибровочными пробами (см. ниже) и прогревают до появления желтого или бурого окрашивания

Получение калибровочных проб

	Проба 1, мл	Проба 2, мл	Проба 3, мл	Проба 4, мл
0,5% р-р глюкозы 1% р-р глюкозы 2% р-р глюкозы 3% р-р глюкозы 10% р-р NaOH	4,0 –– –– –– 1,0	–– 4,0 –– –– 1,0	–– –– 4,0 –– 1,0	–– –– –– 4,0 1,0
	Прогревают все пробы (одновременно с опытными пробами) на кипящей водяной бане до появления интенсивного бурого окрашивания в пробе 4

Сравнивают окраску опытных пробирок и окраску калибровочных пробирок. Визуально определяют содержание глюкозы в моче (в %) по наиболее совпадающему цвету растворов.

Нормальные величины

Моча до 0,5%

Клинико-диагностическое значение

Моча

При нормогликемии глюкозурия может выявляться при повреждениях почечных канальцев – пиело- и гломерулонефриты, токсические поражения, почечный диабет (семейная почечная глюкозурия), нефропатии.

Однако чаще глюкозурия сопровождает гипергликемию, когда содержание глюкозы в крови превышает величину почечного порога (9,0-10,0 ммоль/л).

Глюкозурии могут быть физиологическими и патологическими.

Физиологические глюкозурии

К физиологическим относятся алиментарная глюкозурия, глюкозурия беременных и нейрогенная глюкозурия стрессовых состояний.

Патологические глюкозурии

Возникают чаще всего в результате нарушений обмена углеводов при патологических изменениях в поджелудочной железе (острый панкреатит, сахарный диабет), надпочечниках ("бронзовый" или стероидный диабет), также при тиреотоксикозе, акромегалии, инфаркте миокарда, кровоизлияниях во внутренние органы, отравлениях морфином, фосфором, при острых инфекциях и нервных заболеваниях.

Оформление работы

Указывают принцип метода, ход работы, нормальные величины и результаты исследования, отмечают клинико-диагностическое значение показателя и делают выводы о возможной патологии.

Лабораторная работа 3

Обнаружение молочной кислоты в мышечной ткани с помощью реакции Уффельмана

Принцип

Метод основан на взаимодействии комплексного соединения фенолята железа фиолетового цвета с молочной кислотой с образованием лактата железа желто-зеленого цвета.

Материал исследования

Мышечная ткань.

Реактивы

1) Фосфатный буфер, рН 7,2; 2) 1% р-р фенола; 3) 1% р-р FeCl₃.

Проведение анализа

1. Приготовление экстракта мышечной ткани.

Кусочек мышечной ткани тщательно растирают в ступке с 5,0 мл фосфатного буферного раствора, перемешивают. Полученную мышечную кашицу фильтруют через 2 слоя марли или центрифугируют при 1500 об/мин.

2. Цветная реакция на молочную кислоту.

В пробирке к 10 каплям 1% раствора фенола добавляют 1% раствор FeCl₃до появления фиолетовой окраски. Затем к содержимому пробирки добавляют 3 капли экстракта мышц и наблюдают за изменением окраски. В присутствии молочной кислоты фиолетовая окраска раствора переходит в желто-зеленую вследствие образования лактата железа.