Темы для реферативных сообщений

1. Подагра: этиология, молекулярные механизмы развития, клинические проявления, лечение.

2. Мочекаменная болезнь: этиология, виды мочевых камней, диагностика и клинические проявления, лечение.

3. Ферменты синтеза рибо- и дезоксирибонуклеотидов как мишени для противовирусных и противоопухолевых препаратов.

Лабораторная работа 1

Качественная реакция на мочевую кислоту

Принцип

Мочевая кислота при окислении превращается в соединения (диалуровая кислота, аллоксан), которые конденсируются в аллоксантин. Аллоксантин, взаимодействуя с аммиаком, образует аммонийную соль (мурексид) кирпично-красного цвета. При добавлении КОН к мурексиду образуется калиевая соль сине-фиолетового цвета.

Реактивы

1) Конц. HNO₃, 2) конц. р-р NH₄ОН (аммиак), 3) 10% р-р КOH.

Материал исследования

Кристаллы мочевой кислоты.

Проведение анализа

Кристаллы мочевой кислоты помещают на дно фарфоровой чашки, смачивают каплями азотной кислоты (осторожно!), выпаривают досуха под тягой при температуре не выше 70С. Появляется коричнево-красное пятно.

После охлаждения осторожно на один край пятна наносят 1 каплю раствора аммиака, наблюдают окрашивание в пурпурно-красный цвет. С другого края пятна наносят 1 каплю раствора КОН – появляется сине-фиолетовое окрашивание.

Клинико-диагностическое значение

Мурексидную пробу используют для открытия мочевой кислоты в мочевых камнях и осадках.

Оформление работы

Указывают принцип метода, ход работы, нормальные величины и результаты исследования, отмечают клинико-диагностическое значение показателя и делают выводы о возможной патологии.

Лабораторная работа 2

Определение концентрации мочевой кислоты в биологических жидкостях

Ферментативное определение концентрации мочевой кислоты в сыворотке крови и моче

Принцип

Мочевая кислота расщепляется ферментом уриказой до аллантоина с одновременным образованием пероксида водорода. Последний при участии пероксидазы взаимодействует с дихлоргидроксибензолсульфонатом и 4‑аминоантипирином с образованием окрашенных в розово-малиновый цвет продуктов. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию мочевой кислоты и определяется фотоколориметрически.

Реактивы

1) Рабочий реактив, содержащий фенол, уриказу, пероксидазу, дихлоргидроксибензолсульфонат и 4‑аминоантипирин в калиево‑фосфатном буфере.

Стандартный раствор мочевой кислоты, 500 мкмоль/л.

Материал исследования

Сыворотка крови. Моча (разведение 1:5).

Проведение анализа

	Опыт 1, мл	Опыт 2, мл	Стандарт, мл
Сыворотка крови Моча (разведение 1:5)	0,025 ––	–– 0,025	–– ––
Стандартный раствор мочевой кислоты	––	––	0,025
Рабочий реактив	1,0	1,0	1,0
	Выдерживают 10 минут при температуре 37С. Измеряют оптическую плотность проб против воды при длине волны 540 нм (зеленый светофильтр)

Расчет

Концентрация мочевой кислоты сыворотки, мкмоль/л = ,

Концентрация мочевой кислоты мочи, ммоль/сут = , где

Е_опи Е_ст– оптическая плотность опытной и стандартной проб, С_ст– концентрация мочевой кислоты в стандартной пробе, 5 – разведение мочи, 1000 – коэффициент пересчета мкмоль в ммоль, Д – суточный диурез (1300-1500 мл).