Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
современная генетика т2.doc
Скачиваний:
190
Добавлен:
21.02.2016
Размер:
9.54 Mб
Скачать

Айала ф., Кайгер Дж. Современная генетика: в 3-х т. Т. 2. Пер. С англ.: – м.: Мир, 1988. – 368 с.

11. Передача информации в клетках 65

Таблица 11.4. Сборка РНК-полимеразы из субъединиц in vitro

Субъединицы

Включение [3Н] UTP в РНК при рестриктивной температуре (наномоли)1)

Дикий тип

ХН56

R120

A2R7

3,5

0,2

4,3

0,17

0,09

2,5

0,06

0,47

0,52

1,40

1) 1 наномоль = 10-9моль. Таблица составлена по данным Miller }. et al. 1976. In: RNA Polymerase, eds. R. Losick, M. Chamberlin, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, N.Y., p. 519

11.5. Гены, кодирующие β- и ß'-cyбъeдиницы РНК-полимеразы E. coli, картируются очень близко друг от друга и транскрибируются в составе общей полицистронной мРНК. Ряд температурочувствительных штаммов, мутантных по области ßß', содержат РНК-полимеразу, которая после выделения и очистки проявляет при рестриктивной температуре аномальные свойства. Субъединицы очищенной РНК-полимеразы можно разделить, а после этого снова осуществить сборку фермента с восстановлением исходной активности. Эксперименты по сборке РНК-полимеразы из субъединиц проводили для того, чтобы установить, какие из субъединиц дефектны в ферментах, образуемых тремя мутантными штаммами (ХН56, R120 и A2R7). Из данных, приведенных в таблице 11.4, определите дефектную субъединицу в каждом из штаммов. 11.6. Антибиотики рифампицин и стрептолидигин убивают чувствительные клетки за счет ингибирования синтеза РНК. Изучение очищенной РНК-

полимеразы in vitro позволило установить, что рифампицин блокирует процесс инициации синтеза РНК, а стрептолидигин препятствует транслокации РНК-полимеразы по цепи ДНК и тем самым обрывает начавшийся синтез цепей РНК. Мутантные штаммы E. coli, устойчивые к одному из этих антибиотиков, образуют РНК-полимеразу, которая после очистки проявляет устойчивость к тому же антибиотику in vitro. При проведении экспериментов по сборке фермента из субъединиц подобно тому, как это описано в задаче 11.5, были получены данные, приведенные в таблицах 11.5 и 11.6. Определите, на какие субъединицы действуют вышеназванные антибиотики. 11.7. Некоторые эукариотические цитоплазматические мРНК не содержат полиаденилатного «хвоста». Это наиболее характерно для гистоновых РНК. Учитывая специфическую роль гистонов в цикле клеточного развития, предложите гипотезу относительно функциональной роли polyA-хвоста в структуре мРНК.

Айала ф., Кайгер Дж. Современная генетика: в 3-х т. Т. 2. Пер. С англ.: – м.: Мир, 1988. – 368 с.

66 Экспрессия генетического материала

Таблица 11.5. Сборка РНК-полимеразы из разделенных субъединиц рифампицинчувствительных и рифампицинустойчивых ферментов

Исходные ферменты и субъединицы, использованные при сборке"

Относительная полимеразная активность

Остаточная активность (%)

1) Индексом «р» (от рифампицин) помечены субъединицы устойчивого штамма. (По Heil A., Zillig W. 1970. FEBS Lett, 11, 165.)

Таблица 11.6. Сборка РНК-полимеразы из разделенных субъединиц стрептолидигинчувствительных и стрептолидигинустойчивых ферментов

1) Индексом «с» (от стрептолидигин) помечены субъединицы устойчивого штамма. (По Heil Α., Zillig W. 1970. FEBS Lett., 11, 165.)