Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
современная генетика т2.doc
Скачиваний:
190
Добавлен:
21.02.2016
Размер:
9.54 Mб
Скачать

Айала ф., Кайгер Дж. Современная генетика: в 3-х т. Т. 2. Пер. С англ.: – м.: Мир, 1988. – 368 с.

Рис. 13.5. А. Включение 3Н-тимина (черные кружки) и 14С- лейцина (цветные кружки) в клетки температурочувствительного мутанта dnaE при рестриктивной температуре. После температурного сдвига до 42,5° синтез ДНК практически немедленно прекращается, в то время как синтез белка продолжается с нормальной скоростью. Сравните это с поведением клеток температурочувствительного мутанта dnaА (включение 3Н-тимина- черные квадратики; включение 14С-лейцина- цветные

квадратики), которые в течение 15 мин после повышения температуры до 42,5° продолжают синтезировать ДНК. (По Wechsler J. Α., Gross J. D., 1971. Molec. Gen. Genetics, 113, 273.) Б. На приведенной диаграмме проиллюстрированы различия между процессами инициации и элонгации при репликации хромосомы Е. coli. Мутация dnaE затрагивает элонгацию, а мутация апаА - инициацию репликации.

Айала ф., Кайгер Дж. Современная генетика: в 3-х т. Т. 2. Пер. С англ.: – м.: Мир, 1988. – 368 с.

13. Генетический контроль синтеза ДНК 111

Рис. 13.6. Положение генов, вовлеченных в синтез ДНК, на хромосоме Е. coli.

Локус

Функция

ДНК-полимераза II

Субъединица ДНК-полимеразы III

Субъединица ДНК-полимеразы III

Субъединица ДНК-полимеразы III

Инициация репликации ДНК

Субъединица ДНК-гиразы(топоизомеразы II)

ДНК-лиг аза

Праймазная субъединица праймосомы

Субъединица ДНК-гиразы(топоизомеразы II)

Инициация репликации ДНК

Участок инициации репликации ДНК

Инициация репликации ДНК

ДНК-полимераза I

Субъединица РНК-полимеразы

Субъединица праймосомы

SSB-белок, связывающийся с одноцепочечной ДНК

Субъединица праймосомы

ственной генетической функции. Некоторые мутации такого рода сопровождаются изменениями, затрагивающими уже идентифицированные ферменты. Другие позволяют идентифицировать новые ферменты. Если данная мутация является летальной или условно-летальной, то затрагиваемая ею функция, вероятно, играет важную роль в изучаемом процессе.

Айала ф., Кайгер Дж. Современная генетика: в 3-х т. Т. 2. Пер. С англ.: – м.: Мир, 1988. – 368 с.

112 Экспрессия генетического материала

Первые указания на то, что в системе репликации ДНК участвует целый ряд важных генетических функций, были получены благодаря выделению широкого набора условно-летальных температурочувствительных мутантов Е. coli (dna -), комплементационный анализ которых позволил соотнести их с мутациями в ряде различных генов. Среди них можно выделить два класса мутантов, которые при рестриктивной температуре: (1) немедленно прекращают синтез ДНК или (2) в течение относительно протяженного временного интервала постепенно прекращают синтезировать ДНК (рис. 13.5). Первый фенотип связан с нарушением процесса синтеза ДНК в репликативной вилке, а второй - с исчезновением способности инициировать новый цикл репликации хромосомы. (В несинхронизированной культуре индивидуальные клетки мутантов второго класса, находящиеся на различных стадиях репликации, начавшейся еще при пермиссивной температуре, не прекращают синтезировать ДНК после повышения температуры до полного завершения цикла репликации хромосомы.) После сопоставления выделенных мутаций с определенными белками, на которых сказываются эти мутации, можно начать изучение функциональной роли этих белков in vivo. Локализация генов, ответственных за репликацию ДНК, на хромосоме E. coli показана на рис. 13.6.