Лабораторная диагностика отдельных микозов Лабораторная диагностика глубоких (системных) микозов

Возбудителями глубоких микозов, встречающихся в определенных природных очагах, являются почвенные грибы, вызывающие в ряде случаев развитие тяжелых системных форм инфекции.

Криптокккоз

Возбудителем криптококкоза (европейского бластомикоза) яв­ляется Cryptococcum neoformans, поражающий преимущественно у лиц с иммунодефицитами (как правило, при СПИДе) ткань мозга, легкие, кожу, подкожную клет­чатку и слизистые оболочки. Наиболее часто криптококкоз протекает в виде хронического менингита с частыми ремиссиями и обострениями, иногда переходящего в энцефалит. При генерализации процесса прогноз обычно неблагоприятный. Заболевание встречается редко, но распространено повсеместно. Воз­будитель обитает в почве, в гнездах птиц, на растениях, в пищевых продуктах. Заражение происходит при вдыхании грибка с пылью.

Материалом для исследования при криптококкозе являются мокрота, гной, спинномозговая жидкость, кусочки ко­стей, биоптататов тканей из очагов поражения и секционный материал. Применяются следующие методы лабораторного исследования.

Микроскопический метод - исследование неокрашенных препаратов из материала от больного, в которых возбудитель выглядит в виде округлых или яйцевидных дрожжевых клеток размером 2х5, реже -10-20 мкм, покрытых толстой слизистой капсулой желтоватого цвета, иногда с одной длинной почкой (рис 33 а). Иногда толщина капсулы (до 50мкм) значитель­но превосходит размеры самой клетки гриба. Капсулу можно выявить также методом Гинса-Бурри. Реже исследуют гистологические препараты, окрашен­ные гематоксилином. Тканевая форма криптококка морфологически мало отличается от культуральной.

Микологический метод - посев исследуемого материала на среду Сабуро и другие среды для выращивания грибов. вы­ращивают при 25 — 30 °С. Через 1-5 суток выращивания при температуре 25-30⁰ С на среде Сабуро вырастают блестящие, слизисто-сальные, сметанообразной консистенции колонии беловатого, желтоватого или коричневого цвета с куполообразной гладкой поверхностью (рис. 33 б), реже — морщинистые или мелкозернистые. Идентификацию С. neoformans проводят по морфологическим, культуральным свойствам, способности расти при 37 °С, а также по биохимическим свойствам. Криптококки образовуют уреазу, фенолоксидазу, не растут в присутствии циклогексими­да, неспособны ферментировать углеводы.

а б

Рис. 33. Возбудитель криптококкоза (Cryptococcum neoformans). а – в исследуемом материале, б – колонии на питательной среде.

Серологический метод - имеет вспомогательное значение, т.к. с помощью РА, РНГА, РП, РСК, РИФ антитела при криптококкозе обнару­живаются в невысоких титрах и непостоянно.

Биопроба - внутрибрюшинное или внутримозговое заражение мышей материалом от больных. Через 2-4 недели животных забивают с целью выделения чистой культуры гриба из внутренних органов. Выделенные культу­ры идентифицируют по морфологическим, культуральным и биохимическим свойствам.

Генодиагностика. Разработана ПЦР для диагностики криптококкоза.