Самостоятельная работа студентов

1. Морфология боррелий – возбудителей возвратного тифа (Borrelia recurrentis). Мазок из крови больного возвратным тифом (демонстрация). Окраска по Романовскому - Гимза. Среди эритроцитов заметны тонкие лиловые удлиненные спирохеты, образующие до 9 крупных неравномерных завит­ков.

2. Учет ИФА, поставленного с сывороткой крови больного с подозрением на болезнь Лайма для выявления специфических антител.

Микробиологическая диагностика листериоза

Источником инфекции являются различные виды диких и домашних животных. Человек заражается алиментарным, аэрогенным путями, при контакте с больными животными, а также половым путем при листерийных уретритах. Листериоз протекает в виде глазо-железистой или ангинозно-железистой, нервной (менингит, менингоэнцефалит, энцефалит) и смешанной форм. Листериоз у беременных женщин сопровождается инфицированием плода, приводя либо к его гибели, либо к развитию у него различных уродств.

Материалом для исследования является кровь, смывы из зева, спинномозговая жидкость, околоплодные воды, плацента. Применяются следующие методы диагностики.

Бактериоскопический метод. В мазках из исследуемо­го материала, окрашенных по методу Грама, листерии выглядят в виде мелких коротких (0,5-2x0,4-0,5 мкм) грамположительных па­лочек. Метод имеет ориентировочное значение. В качестве экспресс-диагностики используют прямой метод иммунофлюоресценции.

Бактериологический метод – посев на специальные питательные среды (кровяной агар, сердеч­но-мозговой бульон и др.) и на сре­ды, содержащие селективные добавки (NaCl в высокой концентрации, антибиотики полимиксин и цефтазидим, другие селективные добавки). По­севы культивируют при температуре 35⁰ С в течение 5-7 дней. На кровяном агаре листерии вызывают β-гемолиз. Идентификацию культуры до уровня вида осуществляют на основании изучения мор­фологических, тинкториальных, культуральных, биохимических и антигенных свойств (по Н- и О- антигену). Выполняется также фаготипирование.

Генодиагностика. Для постановки предварительного диагноза применяют ПЦР с целью обнаружения ДНК возбудителя.

Серологические методы диагностики листериоза в реальной практике не при­меняется, т.к. они мало информативны.

Педиатрические аспекты темы

1. При рассмотрении вопросов по бруцеллёзу обратить внима­ние на следующее:

• дети заражаются бруцеллёзом в 60,8% случаев алиментарным путем при употреблении сырого молока и молочных продуктов, реже (в 30,5%), отмечается контактный путь заражения. Внутриутробная пе­редача бруцеллеза и заражение грудных детей через молоко боль­ной матери бывают крайне редко;

• заболеваемость бруцеллёзом появляется в весенние меся­цы (март, апрель, май) в период массового окота скота;

• при серодиагностике бруцеллеза у детей диагностический титр в реакциях Райта и Хеддльсона ниже, чем у взрослых -1:100;

• профилактика бруцеллёза заключается в том, что дети и подростки не допускаются ко всем видам работ с инфицированны­ми животными, а также с сырьем, получаемым от них. Дети, больные бруцеллёзом и дети из очагов инфекции берутся под непрерывное диспансерное наблюдение;

• в очагах бруцеллёза беременные женщины обязательно обследуются на бруцеллез. Больные бруцеллезом беременные жен­щины находятся под диспансерным наблюдением;

• специфическая профилактика бруцеллёза у детей проводит­ся с 7- летнего возраста живой бруцеллёзной вакциной.

Тема 5. МИКРОБИОЛОГИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ: САЛЬМОНЕЛЛЫ - ВОЗБУДИТЕЛИ БРЮШНОГО ТИФА, ПАРАТИФОВ И ПИЩЕВЫХ ТОКСИКОИНФЕКЦИЙ

Микробиологическая диагностика брюшного тифа и паратифов

Ознакомиться со схемой лабораторной диагностики брюшного тифа и паратифов

Возбудителями брюшного тифа и паратифов (А, В) являются бактерии рода Salmonella, в состав которого входят два вида: Salmonella enterica с 6 подвидами (включая возбудители брюшного тифа, паратифов, сальмонеллезов – всего более 2400 сероваров) и Salmonella bongori (редко встречающиеся сальмонеллы). Возбудитель брюшного тифа обозначается как Salmonella серовара Typhi (Salmonella enterica spp. enterica ser. typhi, прежнее назва­ние Salmonella typhi), паратифа А — Salmonella серовара Paratyphi A, паратифа В — Salmonella серовара Paratyphi В.

Методы микробиологической диагностики брюшного тифа и паратифов представлены в схеме 9.

Выбор материала и метода микробиологической диагностики этих заболеваний зависит от стадии патогенеза. На первой неделе заболевания и в течение всего лихорадочного периода возбудитель можно выделить из крови (гемокультура), с конца второй и на третьей неделе — из мочи (уринокультура) и испражнений (копрокультура). Высокий процент высеваемости возбудителя отмечается при исследовании костного мозга (выделение миелокультуры). Удается обнаружить сальмонеллы в скарификате розеол (розеоло-культура), ликворе, содержимом две­надцатиперстной кишки, секционном материале. У реконвалесцентов исследуют испражнения и желчь (выделение биликультуры). Начиная со второй недели заболевания проводят серологи­ческое исследование. Микроскопическое исследование материала от больного не проводится, т.к. все энтеробактерии (как патогенные, так и непатогенные, например, E.coli) по морфологическим свойствам идентичны (рис. 14).

Бактериологическое исследование является основным лабораторным методом диагностики брюшного тифа и паратифов.

Ранним и надежным методом бактериологической диагностики является выделение возбудителей из крови (гемокультура). Взятую в асептических условиях кровь (15-20 мл) засевают на 10% желчный бульон или среду Рапопорт (10% желчный бульон, 1 % маннита или 2 % глюкозы, 1 % индикатора Андреде; в среду помещен поплавок для улавливания газа) в соотношении крови и среды 1:10 для накопления сальмонелл. Посевы инкубируют при 37⁰ С 18 —24 ч. При наличии сальмонелл маннит или глюкоза расщепляется с образованием кислоты и среда приобрета­ет красный цвет; появление в поплавке газа свидетельствует о газообразовании - характерном признаке паратифозных бактерий.

Схема 9. Микробиологическая диагностика брюшного тифа и паратифов.