Тема 5. Физиология бактерий. Дыхание и размножение бактерий. Методы культивирования аэробов и анаэробов Самостоятельная работа студентов

1. Выделение чистой культуры аэробных бактерий от потенциального носителя золотистого стафилококка (самостоятельная работа). Продолжить работу по бактериологическому исследованию, начатую на предыдущем занятии: рассмотреть чашку с выросшими колониями и об­вести карандашом по дну различные типы колоний, у которых изучить культу­ральные свойства в соответствии с таблицей 3.

Учитываются следующие признаки колоний:

• размер (измеряется миллиметровой полоской со стороны дна диаметр колонии);

• форма (круглая, неправильная);

• цвет (красный, желтый и т.д. Беспигментные колонии имеют отте­нок среды, например сероватый на МПА);

• поверхность (выпуклая, плоская, блестящая, матовая, гладкая, шероховатая);

• край (ровный, изрезанный, волнообразный, фестончатый). Колонии зарисовать.

Для дальнейшего изучения выбирают одну из колоний. С целью сохра­нения и накопления выделенной чистой культуры сделать пересев из ко­лонии на скошенный МПА.

Техника пересева: снять крышку чашки, взять чашку в левую руку в вертикальном положении, посевом обратив к себе. Стерильной петлей взять из центра колонии культуру и засеять на скошенный МПА зигзагообразной линией, двигаясь снизу вверх. Прокалить петлю в пламени спиртов­ки, аккуратно подписать пробирку в верхней трети и поместить ее в термостат на сутки. Результаты исследования занести в протокол. Работа будет продолжена на следующем занятии.

Таблица 3

Характеристика колоний бактерий

Признаки колоний	Описание свойств колоний
Размер	Проводится измерение диаметра колоний
Форма	Круглая, неправильная
Цвет	Красный, желтый и т.д. Беспигментные колонии имеют оттенок среды, например, сероватый на МПА
Поверхность	Выпуклая, плоская, блестящая, матовая, гладкая, морщинистая, шероховатая, исчерченная и т.д.
Структура	Чашка Петри с ростом колоний кладется дном вверх на предметный столик микроскопа и колония изучается у ее края при малом увеличении с опущенным конденсором. Структура может быть гомогенной, мелко-, крупно-, неравномерно-зернистой, волокнистой
Край	Изучается вместе со структурой. Может быть ровным, изрезанным, волнообразным, фестончатым
Консистенция	Определяется при взятии петлей для приготовления мазка. Консистенция может быть слизистой (культура тянется – подозрение на наличие капсулы), влажная (легко берется) и сухая (крошится – подозрение на спорообразующие бактерии)
Тинкториальные (отношение к окраске) и морфологические свойства	Изучаются соответствующие свойства бактерий, находящихся в колонии

2. Выделение чистой культуры анаэробных бактерий из почвы (де­монстрация).

• изучение характера роста на среде Китт-Тароцци;

• изучение морфологических и тинкториальных свойств микроор­ганизмов, выросших на среде Китт-Тароцци; приготовление мазка, окраска его по Граму, микроскопия. Обратить внимание на наличие в микропрепарате крупных, расположенных беспорядочно или корот­кими цепочками, грамположительных палочек;

• посев одной петли материала со среды Китт-Тароцци в высокий столбик МПА, расплавленного на водяной бане и остуженного до 45° С. Результаты исследования занести в протокол № 2. Работа по выделению анаэробов из почвы будет продолжена на следующем занятии.

3. Выделение чистой культуры протея по методу Шукевича (самостоятель­ная работа). Произвести посев исследуемого материала петлей в конденсацион­ную воду скошенного МПА. Ход исследования отразить в протоколе.