Тема 3. Возбудители бактериальных зоонозных инфекций: чумы, туляремии, сибирской язвы

Цель занятия: изучение биологических свойств основных возбудителей бактериальных зоонозных инфекций - чумы, туляремии, сибирской язвы, методов их лабораторной диагностики, профилактики и лечения.

Перечень конкретных учебно-целевых вопросов

1. Понятие об особо-опасных, зоонозных, карантинных инфекциях. Правила работы с возбудителями особо-опасных инфекций.

2. Возбудитель чумы, история изучения, биологические свойства. Роль отечественных ученых в изучении чумы. Патогенез, иммунитет, методы микробиологической диагностики и специфичес­кой профилактики.

3. Возбудитель туляремии. Биологические свойства. Патогенез, иммунитет, методы микробиологической диагностики и специфической профилактики туляремии.

4. Возбудитель сибирской язвы. Морфологические, культуральные, био­химические и антигенные свойства. Резистентность. Патогенность для че­ловека и животных. Факторы патогенности, токсины. Патогенез заболевания у человека, иммунитет. Микробиологическая диагностика. Специфическое лечение и профилактика сибирской язвы.

Микробиологическая диагностика чумы.

Возбудитель чумы – Yersinia pestisотносится к высокопатогенным микроорганизмам (1 группы патогенности). Взятие, доставка материала при подозрении на чуму и работа с ним производятся в специализированных лабораториях с соблюдением осо­бых правил предосторожности (в противочумном костюме, с при­менением специальных средств и устройств, предотвращающих попадание микроорганизма на кожу, слизистые оболочки и в дыхательные пути медицинского персонала, а также на различные объекты внешней среды).

В зависимости от способа заражения различают бубонную, легочную, кишечную формы, реже возникает септическая и кожная формы. Материал, подлежащий исследованию на чуму (см. схему 4), помещают в банки, которые герметично закрывают, обрабатывают снаружи 5% раствором лизола, наклеивают этикетку с указанием вида материала, даты и места его взятия, фамилии и инициалов больного, а также диагноза. Банки плотно уклады­вают в герметичную тару, на крышке которой указывают «Верх»; в банку вкладывают опись направляемых на исследование материалов. Ма­териалы подлежат немедленной отправке в лабораторию на специальном транспорте с сопровождающим лицом. Перед исследованием тара с материалом и другие потенциально заражен­ные предметы обрабатываются дезинфицирующим раствором.

Лица, контактировавшие с мате­риалом, подозрительным на содержание возбудителя чумы, подвергаются полной санитарной обработке.

Принципы микробиологической диагностики чумы отражены в схеме 4.

Бактериоскопический метод. Мазки, приготовленные из исследуемого материала, фиксируют в смеси Никифорова, окрашивают по Граму и метиленовым синим. С целью экспресс-диагностики мазки обрабаты­вают также меченой люминесцирующей сывороткой к Y. pestis (прямой ИФМ). Предварительный положительный ответ выдается в случае обнаружения в мазках биполярно ок­рашенных грамотрицательных овоидных бактерий, окруженных нежной капсулой (рис.7), дающих специфическое све­чение в РИФ.

В качестве других методов экспресс-диагностики чумы применяют РНГА с иммуноглобулиновым чумным диагностикумом, ИФА для индикации антигенов возбудителя.

Методы ускоренной и экспресс-диагностики дают возможность дать предвари­тельный ответ через 4 ч от начала исследования, окон­чательный - через 18-20 ч.

Бактериологическое исследование. Кровь при подозрении на чуму засевают на МПБ во флаконах; содержимое бубона, отде­ляемое язвы, мокроту и другой материал — на МПА с цельной или гемолизированной кровью кролика или лошади в чашках Петри с антифаговой сыво­роткой для нейтрализации чумного фага, раствором генцианового фиолетового и сульфита натрия для подавления роста посторонней микрофлоры, находящейся в исследу­емом материале. Применяют также селективную среду с антибиотиками — агар CIN. Посевы инкубируют при 25—28 °С. Через 16—20 ч на чашках под малым увеличением микроскопа обнаруживают рост колоний в виде скоп­лений осколков битого стекла, которые к 48 ч приобретают вид R-формы с компактным приподнятым центром и ажурной полу­прозрачной периферией («кружевные платочки» - рис. 8). На поверхности МПБ через 24 ч образуется рыхлая пленка, от которой спускаются тяжи, напоминающие сталактиты.

Схема 4. Микробиологическая диагностика чумы

Материал: пунктат из бубона, мокрота, кровь, испражнения