§ 7. Нитриты

Все объявления

ЯндексДирект

Дать объявление

• Низкотемпературные камеры

низкотемпературные морозильники с температурным режимом -24С, -55С, -85С

Адрес и телефон·  www.winecoolers.ru

Для выделения нитритов из биологического материала применяют метод настаивания исследуемых объектов сводой, который используется для выделения минеральных кислот ищелочей.

Водные вытяжки, полученные при настаивании биологического материала с водой, фильтруют. Полученные фильтраты подвергаютдиализу. Диализаты доводят до нейтральной реакции, а затем определяют наличие нитритов при помощи реакций с диазо-тированной сульфаниловой кислотой и с реактивом Грисса.

Реакция с сульфаниловой кислотой и β-нафтолом. После подкисления диализатов, содержащих нитриты, выделяетсяазотистая кислотаHNO₂, которая с сульфаниловой кислотой (I) или с другими первичными ароматическимиаминамиобразуетсоль диазония(II):

При сочетании полученной соли диазонияс β-нафтолом (III) в щелочной среде образуетсяазокраситель(IV):

Сочетание солей диазониясфеноламииаминамипроисходит в параположении по отношению к фенольным или аминным группам. Если параположение занято, то сочетание происходит в орто-положении.

Выполнение реакции.В углублении на капельной пластинке или в маленькую пробирку вносят 1—2 капли нейтрализованного диализата, прибавляют 2—3 капли 0,5 %-горастворасульфаниловой кислоты в 2 %-йсоляной кислоте. Послеперемешиванияэтихжидкостейчерез 3—5 мин прибавляют каплю щелочногораствораβ-нафтола. При наличии нитритов в исследуемомрастворепоявляется интенсивная оранжево-красная окраска. Ин-тенсивость окраски зависит от содержания нитритов в пробе.

Приготовление щелочного раствора β -нафтола (см. Приложение 1, реактив 23).

Реакция с реактивом Грисса. Этот реактив состоит из суль-фаниловой кислоты и α-нафтиламина. При взаимодействии реактива Грисса с нитритами образуетсяазокраситель:

Выполнение реакции.В углубление на капельной пластинке или в маленькую пробирку вносят несколько капель нейтрализованного диализата, а затем прибавляют 3—4 капли реактива Грисса. При наличии нитритов в водной вытяжке сразу или спустя некоторое время появляется интенсивная красная окраска. Интенсивность окраски зависит от количества нитритов в пробе.

Приготовление реактива Грисса (см. Приложение 1, реактив 31).

О наличии нитритов в диализатах свидетельствует появление ярко выраженных окрасок при указанных выше реакциях.

Если при реакции с сульфаниловой кислотой и с реактивом Грисса появляется слабоинтенсивная окраска, то возникает вопрос о возможном появлении окрасок не за счет нитритов, вызвавших отравление, а за счет наличия их в окружающей среде. Б этих случаях проводят отгонку нитритов из диализатов в токеоксида углерода(IV).

Часть подлежащего исследованию диализата вносят в колбу вместимостью 50 мл и подкисляют уксусной кислотой, которая из нитритов вытесняетазотистую кислотуи не вытесняетазотную кислотуиз нитратов. После подкисления диализата изаппаратаКиппа через колбу пропускают тококсида углерода(IV), который переноситазотистую кислотуили ее ангидрид в приемник, содержащий 1 %-йрастворгидроксида натрия.

После отгонки азотистой кислотысодержимое приемника нейтрализуют 10 %-мрастворомсоляной илиуксусной кислоты(не допуская избытка этих кислот), а затем в нейтрализованном дистилляте определяют наличие нитритов при помощи описанных выше реакций с реактивом Грисса, с сульфаниловой кислотой и β-нафтолом, а также с помощью реакции окрашивания иод-крахмальной бумажки.

Обнаружение нитритов с помощью иод-крахмальной бумажки.

На иод-крахмальную бумажку наносят каплю 1 %-го растворасоляной кислотыи 3—4 капли нейтрализованного дистиллята. При наличии нитритов в дистилляте иод-крахмальная бумажка синеет.

Приготовление иод-крахмальной бумажки (см. Приложение 1, реактив 4).

При положительных реакциях дистиллята с сульфаниловой кислотой, реактивом Грисса и иод-крахмальной бумажкой делают вывод о наличии нитритов в биологическом материале.

Для решения вопроса о составе нитритов, обнаруженных при помощи указанных выше реакций, производят реакции на катионынатрияикалия. С этой цельюберутдиализат и поступают так, как указано выше (см. гл. VII, § 4, 5).