§ 59. Нитразепам
Нитразепам(радедорм, эуноктин, могадон, неозепам и др.) — светло-желтый или светло-желтый с зеленым оттенком кристаллическийпорошок. Практически нерастворим вэтиловом спиртеихлороформе.
Нитразепамэкстрагируется органическимирастворителямииз щелочных водныхрастворов.
Применение. Действие на организм.Нитразепам, как и другие производные бензодиазепина, оказывает транквилизирующее, мышечно-расслабляющее, снотворное действие и т. д. Он усиливает снотворное действие другихснотворных средстви анальгетиков. Применяется при нарушениисна, неврозах, психопатиях. В комбинации с другими препаратами применяется при лечении шизофрении, эпилепсии и др.
Метаболизм.Метаболитаминитразепама являются 7-амино-метаболит, 7-ацетиламино-метаболит. В течение 48 ч изорганизмавыделяется около 23 % принятойдозынитразепама. В неизмененном виде с мочой выделяется около 5 % этого препарата. Свыше 8 % нитразепама выделяется с мочой в виде 7-амино-
метаболитаи около 10%—в виде 7-ацетиламино-метаболита. Часть неизмененного нитразепама может быть обнаружена в кале.
Выделение нитразепама из биологического материала.Биологический материал трижды настаивают с новыми порциями насыщенного водногорастворащавелевой кислоты(рН=1). Через 1 ч после каждого настаивания вытяжки отделяют от биологического материалацентрифугированием. Объединенный кислый центрифугат трижды взбалтывают со смесью (1:1)хлороформаиэтилацетата(по 20, 15 и 15 мл). Затем кислый центрифугат подщелачивают до рН = 10 и трижды взбалтывают с новыми порциями (20, 15 и 15 мл) смесихлороформаиэтилацетата(1 : 1). Полученные при этом вытяжки подвергают исследованию на наличие нитразепама.
Предварительные пробы на наличие нитразепама в моче. Нитразепамможно обнаружить в моче в неизмененном виде и в виде 7-амино- и 7-ацетиламино-производных, являющихсяметаболитамиэтого препарата, как указано ниже.
Обнаружение нитразепама в неизмененном виде в моче.5 мл мочи подщелачиваютаммиакомдо рН=10 и прибавляют 250 г дитионитанатрия(Na2S2O4). Смесь взбалтывают в течение 10 мин, затем нагревают при 50 °С в течение часа и охлаждают. Охлажденнуюжидкость10 мин взбалтывают с 10 мл смеси, состоящей из равных объемовметиленхлоридаиэтилацетата. После этого от водной фазы отделяют слой смеси органическихрастворителей. Слой взбалтывают с 10 мл 5 %-горастворабуры. Водную фазу отделяют от фазы органическихрастворителей. К фазе органическихрастворителейприбавляют 5 мл 0,2 н.растворасоляной кислотыи взбалтывают. После этого отделяют фазу органическихрастворителей. 4 мл кислой водной фазы охлаждают в ледянойводеи прибавляют 0,2 мл 0,4 н.растворанитрита натрия. Через 5 мин к кисломурастворуприбавляют 0,2 мл 2%-горастворасульфаминатааммония.Жидкостьхорошо перемешивают и оставляют на 5 мин, а затем прибавляют 0,2 мл 0,4 %-гораствораN-1-нафтилэтилендиамина дигидрохлорида. При наличии нитразепама в моче появляется вишнево-красная окраска (А = 555 нм).
Выделение метаболитов нитразепама из мочи.Выделение этих соединений из мочи проводят так же, как и при обнаружении нитразепама, находящегося в моче в неизмененном виде. Однако при исследованииметаболитовв процессе их выделения из мочи к ней не прибавляютдитионит натрия. Выделенные из мочиметаболитынитразепама обнаруживают методомхроматографии.
Обнаружение нитразепама и его метаболитовметодомхроматографии. Исследуемыйрастворнаносят на хроматографическую пластинку, покрытую тонким закрепленным слоемсиликагеля, или на пластинку «силуфол». Для развития хроматограммы на пластинке применяют системурастворителей, являющуюся смесьюэтилацетата,метилового спиртаи 25 %-гоаммиака(85: 10:5). Пятна нитразепама и егометаболитовна пластинках проявляются реактивом Драгендорфа.
Приготовление хроматографических пластинок(см. Приложение 2, способ 10).
Обнаружение нитразепама по УФ- и ИК-спектрам.Растворнитразепама вэтиловом спиртеимеет максимумы поглощения при 218 и 260 нм, в 0,1 и.растворесерной кислотыимеет максимум поглощения при 277 нм и изгиб около 340 нм;нитразепамв ИК-области спектра (диск с бромидом калия) имеет основные пики при 1692, 1615, 1352 и 702 см-1.