§ 34. Морфин
Морфинявляется одним из главныхалкалоидовопия, в котором содержится 3—20 % этогоалкалоида. Вмолекулеморфинасодержитсяатомазота, ОН-группа фенольного-и ОН-группа спиртового характера. Наличиеатомаазотаи указанных ОН-групп обусловливаетхимическиесвойстваморфина, используемые для аналитических целей. Осно ваниеморфинаслабо растворяется вводе(в холодной 1 :5000, в кипящей — 1 :500) идиэтиловом эфире(1:7630). Еще хуже основаниеморфинарастворяется вдиэтиловом эфире, насыщенномводой(1 : 10 600). Основаниеморфинаслабо растворяется вбензоле(1 : 1600) ихлороформе(1 : 1500), лучше — вэтиловом спирте(в холодном 1 : 250, в кипящем — 1:13).
Ацетатморфинарастворяется вэтиловом спирте(1: 100), лучше — вводе(1 : 2,5), почти не растворяется вдиэтиловом эфире.
Гидрохлорид морфинарастворяется вэтиловом спирте(1 : 100),воде(1 : 23), почти не растворяется вдиэтиловом эфиреихлороформе.
Сульфат морфинаслабо растворяется вэтиловом спирте(1 : 1000), лучше — вводе(1 :21), практически не растворяется вдиэтиловом эфиреихлороформе.
Тартрат морфинарастворяется вводе(1 : 10), хуже — вэтиловом спирте(1 : 1000), почти не растворяется вдиэтиловом эфиреихлороформе.
Морфинэкстрагируется органическимирастворителямииз щелочных водныхрастворов. Максимальные количестваморфинаэкстрагируютсяхлороформомпри рН = 8,6...10,2.
Применение. Действие на организм.В медицине применяется гидрохлоридморфина. Этот препарат является основным представителем группы наркотических анальгетиков.
Морфиноказывает сильное болеутоляющее действие, понижает возбудимость болевых центров, оказывает противошоковое действие при травмах и т. д.Морфинвызывает эйфорию. При повторном примененииморфинак нему быстро развивается болезненное пристрастие (морфинизм). Слабо всасывается в кровь через пищеварительную систему. После парентерального введенияморфинаворганизммаксимальный уровень его в крови достигается примерно через 1 ч.
Метаболизм.Ворганизмеосновное количествоморфинасвязывается сглюкуроновой кислотойи в виде глюкуронида выделяется с мочой. За первые 8 ч после введенияморфина50 % его выделяется с мочой в виде глюкуронида, а за 24 ч выделяется изорганизмапримерно 90 % глюкуронидаморфина. Ворганизменезначительная частьморфинаподвергается N-деметилированию (образуется норморфин) и О-метилированию (образуется кодеин).
В органах трупов морфинпостепенно превращается в псевдоморфин (оксидиморфин, дегидроморфин), по которому определяют отравлениеморфином.
Выделение морфина из биологического материала.Для выделенияморфинаиз биологического материала рекомендованы методы, основанные на изолировании этогоалкалоидаспиртом, подкисленнымщавелевой кислотой, иливодой, подкисленной щавелевой илисерной кислотой. Большие количестваморфинавыделяются с помощью метода, основанного на изолировании еговодой, подкисленнойсерной кислотой.
Обнаружение морфина
Реакции с реактивами группового осаждения алкалоидов.
Морфиндаетосадки с реактивами групповогоосажденияалкалоидов(реактивы Бушарда, Драгендорфа, Майера, Зонненшейна и др.).
Цветные реакции. Морфиндаетокраску с концентрированнойазотной кислотой, реактивами Манделина, Марки, Фреде и Эрдмана. Эти реакции описаны выше (см. гл. V, § 7).
Реакция Пеллагри. При нагреванииморфинас концентрированными соляной исерной кислотамион превращается вапоморфин, которыйдаетположительную реакцию Пеллагри. Выполнение реакции Пеллагри наморфиннесколько отличается от способа выполнения этой реакции наапоморфин. При выполнении реакции Пеллагри наморфиникодеиних переводят вапоморфинпутем нагревания с концентрированными соляной исерной кислотами, а затем прибавляют остальные реактивы, необходимые для протекания этой реакции.
Выполнение реакции. В пробирку вносят несколько капель хлороформной вытяжки, которую выпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют 1—2 капли концентрированнойсоляной кислоты. Послерастворениясухого остатка в этой кислоте в пробирку вносят 1—2 капли концентрированнойсерной кислотыи смесь нагревают на водяной бане до полноговыпариваниясоляной кислоты. После этогожидкостьеще нагревают в течение 15 мин, потом охлаждают и прибавляют 2—3 млводы. Если при этом образуется осадок, то его растворяют в нескольких миллилитрах разбавленнойсоляной кислоты. Полученныйрастворнейтрализуют 10 %-мрастворомкарбоната натрияи прибавляют 2—3 капли спиртовогораствораиода. При этом появляется зеленая окраска. После прибавления 0,5—1,0 млдиэтилового эфираи взбалтывания водный слой сохраняет зеленую окраску, а зфирный приобретает пурпурно-красную. Избытокиодамешает этой реакции, так как его окраска маскирует окраску конечного продукта реакции. Реакцию Пеллагридаюти другиевещества(кодеин, этилморфин,диацетилморфин,апоморфини др.).
Реакция с хлоридом железа (Ш). В фарфоровуючашкувносят несколько капель хлороформной вытяжки, которую при комнатнойтемпературевыпаривают досуха. К сухому остатку прибавляют 1—2 капли свежеприготовленного 2 %-горастворахлорида железа(Ш). При наличииморфинапоявляется синяя окраска.
Реакция с йодноватой кислотой (НIO 3 ). При взбалтываниираствораморфина, слабо подкисленногосерной кислотой, срастворомйодноватой кислоты илирастворомиодата калия(KIO3), не содержащегоиодидов, выделяется свободныйиод, который при взбалтывании схлороформомпереходит в хлороформный слой, окрашивая его в фиолетовый цвет.
Эту реакцию даюти некоторые примеси, которые переходят в хлороформную вытяжку при выделенииморфинаиз биологического материала. Поэтому реакцию с HIO3можно применить для обнаруженияморфинав препарате и смесях лекарственныхвеществ, а также в хорошо очищенных вытяжках из биологического материала.
Реакция с гексацианоферратом (Ш) калия и хлоридом железа (Ш). Эта реакция основана на том, что гексацианоферрат (III)калияокисляетморфини превращается в гексацианоферрат (II)калия, который взаимодействует схлоридом железа(III). При этом образуется берлинскаялазурь, имеющая синюю окраску. Реакцию с гексацианоферратом (III)калиявыполняют так: к водномурастворуисследуемоговеществаприбавляют несколько капель смесирастворовгексацианоферрата (III)калияихлорида железа(III). При наличииморфинапоявляется синяя окраска или такого же цвета осадок.
Эту реакцию даюти некоторые примеси, которые из биологического материала переходят в алкалоидные вытяжки. Поэтому реакцию с гексацианоферратом (III)калияприменяют для обнаруженияморфинав лекарственных смесях и в хорошо очищенных вытяжках из биологического материала.
Метод хроматографии. Налиниюстарта на хроматографической пластинке наносят 1—2 капли хлороформной вытяжки. Правее на расстоянии 2—3 см налиниюстарта наносят каплюраствора«свидетеля» (0,01 %-йрастворморфинав хлороформе). Пятна на пластинке подсушивают навоздухе. Затем пластинку вносят в камеру для хроматографирования, насыщеннуюпарамирастворителей(эфир —ацетон— 25 %-ыйаммиакв соотношении 40 : 20 : 2). Камеру плотно закрывают крышкой. После того как системарастворителейподнимется на 10 см вышелиниистарта, пластинку вынимают из камеры, подсушивают навоздухеи опрыскивают реактивом Драгендорфа, модифицированным по Мунье.
При наличии морфинапятна этогоалкалоидана хроматографической пластинке приобретают розовато-бурую окраску (Rf = 0,18±0,01).
Приготовление реактива Драгендорфа, модифицированного по Мунье(см. Приложение 1, реактив 33).
Приготовление хроматографической пластинки (см. Приложение 2, способ 1).
Обнаружение морфина по УФ- и ИК-спектрам. Растворморфинавэтиловом спиртеимеет максимум поглощения при 287 нм. В 0,1 н.растворегидроксида натриямаксимумы поглощенияморфинанаблюдаются при длинах волн, равных 250 и 296 нм. В 0,1 н.растворесерной кислотыморфинимеет максимум поглощения при 284 нм. Водныерастворыгидрохлорида и сульфатаморфинаимеют максимум поглощения при 285 нм.
В ИК-области спектра основание морфина(диск с бромидом калия) имеет основные пики при 805, 1243, 1448, и 945 см-1.
Фотоколориметрический метод определения морфина
Для фотоколориметрического определения морфинаприменяют метод, основанный на реакции этогоалкалоидас кремне-молибденовой кислотой, в результате которой возникает синяя окраска (по В. Ф. Крамаренко).
Техника определения.В мерную колбу вместимостью 25 мл вносят 3 мл 0,11 %-горастворасиликатакалияK2SiO3, 4 млводы, 2 мл 0,5 н.растворасоляной кислотыи 2 мл 5 %-горастворамолибдата аммония. Через 3 мин прибавляют 2 мл исследуемогораствораи 5 мл 6 %-гораствора аммиака. Через 10 мин объемжидкостидоводятводойдо метки и измеряют оптическую плотность окрашенного в синий цветрастворас помощью фотоэлектроколориметра ФЭК-М (светофильтр красный, кювета 3 мм). В качестверастворасравненияберутсмесь, состоящую из 3 мл 0,11 %-горастворасиликатакалия, 2 мл 0,5 н.растворасоляной кислоты, 2 мл 5 %-горастворамолибдата аммония, 5 мл 6 %-гораствора аммиакаи 13 мл.воды.
Расчет содержания морфинав пробах производят по калибровочному графику. Для построения калибровочного графика в 6 мерных колб вместимостью по 25 мл каждая вносят по 3 мл 0,11 %-горастворасиликатакалия, 4 млводы, 2 мл 0,5 н.растворасоляной кислотыи 2 мл 5 %-горастворамолибдата аммония. Через 3 мин в колбы вносят соответственно по 0,1; 0,5; 0,8; 1,0; 1,5 и 2,0 мл стандартногораствора(в 1 мл стандартногорастворасодержится 2 мг гидрохлорида морфина), а далее поступают, как указано выше.
Этот метод позволяет определять от 0,2 до 4 мг морфинав пробе.