§ 7. Обнаружение ядовитых веществ, изолируемых подкисленной водой или подкисленным этиловым спиртом

К числу ядовитых веществ, которые изолируются из биологического материала подкисленнойводойили подкисленнымэтиловым спиртом, в основном относятсяалкалоиды, их синтетические аналоги и некоторые другиевещества. Для обнаруженияалкалоидовприменяют реакцииосаждения, цветные реакции, физические, физико-химические методы анализа, а в ряде случаев проводят фармакологические пробы.

Реакции осаждения.Переведениеалкалоидови их синтетических аналогов в осадки является одним из методов обнаружения этихвеществв химико-токсикологическом анализе. С этой целью применяются реактивы групповогоосажденияалкалоидов, К таким реактивам относятся: некоторыекомплексные соединения, гетерополикислоты,таннин, пикриновая, пикролоновая кислоты и др. Ккомплексным соединениям, являющимся реактивами групповогоосажденияалкалоидов, относятся: реактив Бушарда (раствориодавиодидекалия), реактив Драгендорфа (тетраиод-висмутат калия), реактив Майера (тетраиодмеркуроат калия), платинохлористоводородная кислота и др. Из гетерополикислот в качестве реактивов групповогоосажденияалкалоидовиаминовприменяются: фосфорно-молибденовая кислота (реактив Зонненшейна), фосфорно-вольфрамовая кислота (реактив Шейблера), кремневольфрамовая кислота (реактив Бертрана) и др.

Почти все реактивы группового осаждениясалкалоидами, их синтетическими аналогами и другими органическимивеществамиосновного характерадаютаморфные осадки.

При использовании гетерополикислот и органических кислот в качестве реактива группового осажденияалкалоидови их синтетических аналогов с исследуемымивеществамиобразуются соответствующиесоли. Если в качестве реактивов групповогоосажденияна указанныевеществаприменяютсякомплексные соединения(реактивы Бушарда, Майера, Драгендорфа и др.), то образуются осадки, являющиеся ионными ассоциатами.

В реактивах группового осажденияалкалоидов, которые представляют собойкомплексные соединения,анионамиявляютсяацидокомплексы(см. гл. VI, § 12). Этианионыв кислой среде салкалоидамиобразуют ионные ассоциаты, которые выпадают б осадок.

Образование ионных ассоциатов алкалоидовс одним из реактивов групповогоосажденияалкалоидов(реактивом Драгендорфа) на примере кониина можно представить следующим уравнением:

Реактивы группового осажденияалкалоидовтакжедаютосадки с белковымивеществамии продуктами ихгидролиза. Таким образом, реакции токсическихвеществс реактивами групповогоосажденияалкалоидовявляются не специфичными. Эти реакции могут быть использованы в качестве предварительных проб на наличиеалкалоидови других азотсодержащих органическихвеществосновного характера, выделенных из биологического материала. При положительных результатах этих проб необходимо проводить дальнейшее исследованиевеществ, выделенных из биологического материала, на наличие отдельныхалкалоидови других азотистых оснований с помощью соответствующих реакций и методов. Поэтому в химико-токсикологическом анализе большое значение имеют отрицательные результаты реакций с реактивами групповогоосажденияалкалоидов. При отрицательных результатах этих реакций из плана химико-токсикологического анализа можно исключить исследованиеалкалоидови других азотистых оснований.

Только в редких случаях алкалоидыи некоторые азотистыевеществаосновного характера с реактивами групповогоосажденияобразуют характерной формы кристаллические осадки. Образование таких осадков может быть использовано для обнаружения соответствующихалкалоидови другихвеществпо формекристаллових осадков с групповыми реактивами.

Выполнение реакций осаждения. Несколько капель хлороформной вытяжки из щелочной среды наносят на предметное стекло и при комнатнойтемпературевыпаривают досуха. Сухой остаток на предметном стекле растворяют в 1—2 каплях 0,01 н.растворасоляной кислоты. Рядом с этимрастворомна предметное стекло наносят каплю одного из реактивов групповогоосажденияалкалоидов. Эти капли соединяют друг с другом при помощи стекляннойпалочки. Появление осадка или мути указывает па наличие в исследуемомраствореалкалоидовили других азотсодержащих органическихвеществосновного характера.

Цветные реакции. Для обнаруженияалкалоидовв основном используются цветные реакции. Химизм большинства этих реакций не изучен. Реактивы, применяемые для обнаруженияалкалоидовпри помощи цветных реакций, относятся к различным классамхимическихсоединений. Для этой цели применяются концентрированные серная иазотная кислоты, а также смеси концентрированнойсерной кислотыс другими соединениями. Значительную группу реактивов, применяемых для обнаруженияалкалоидов, составляют органическиевещества.

С концентрированной серной кислотойдаютокраску наркотин (желто-зеленая окраска, через несколько суток переходящая в вишнево-красную), тебаин (кроваво-красная окраска, переходящая в желтую) и другиеалкалоиды. С концентрированнойазотной кислотойдаютокраскубруцин(кроваво-красная окраска, переходящая в оранжевую, а затем в желтую),морфин(кроваво-красная окраска, переходящая в оранжево-желтую) и некоторые другиеалкалоиды.

Для обнаружения алкалоидови других азотистых оснований применяют реактив Эрдмана (смесь концентрированной азотной и серной кислот), реактив Манделина (концентрированнаясерная кислота, содержащая ванадиевую кислоту), реактив Марки (концентрированнаясерная кислота, содержащая формальде гид), реактив Фреде (концентрированнаясерная кислота, содержащая молибденовую кислоту) и др. Приготовление этих реактивов приведено в Приложении 1. Реакции отдельныхалкалоидовс этими реактивами приводятся в табл. 6.

Выполнение цветных реакций. Часть хлороформной вытяжки из щелочной среды вносят в фарфоровыечашкиили в углубления на фарфоровых пластинках.Хлороформвыпаривают досуха. На сухие остатки наносят по капле соответствующих реактивов. При положительных реакциях проводят контрольные опыты срастворамичистых препаратов.

Кроме перечисленных выше реактивов, дающихокраску салкалоидамии другимивеществамиэтой группы ядов, для обнаружения токсическихвеществв химико-токсикологическом анализе применяются многие органические соединения. Реакции этих соединений с ядовитымивеществамиприведены ниже при описании способов обнаружения соответствующих токсическихвеществ.

Микрокристаллоскопические реакции. Для обнаружения рядаалкалоидови других токсическихвеществв химико-токсикологическом анализе применяют микрокристаллоскопические реакции. Эти реакции основаны наосажденииисследуемыхвеществс помощью соответствующих реактивов и на определении формы образующихсякристаллов.

При использовании микрокристаллоскопических реакций для идентификациитоксическихвеществмогут возникать определенные затруднения. Главным затруднением является то, что форма образующихсякристалловзависит от многих факторов, к числу которых относятся:концентрацияисследуемоговещества,концентрацияреактива, соотношение объемоврастворовисследуемоговеществаи реактива,температура, рН среды, наличие примесей,полиморфизмобразующихсякристаллови т. д. (см. гл. III, § 2). В связи с указанным выше трудно учесть влияние такого большого числа факторов на форму образующихсякристаллов. Поэтому микрокристаллоскопические реакции должны выполнять лица, имеющие необходимые знания в областикристаллохимиии кристаллографии.

Физические и физико-химические методы. В химико-токсикологическом анализе для обнаруженияалкалоидови другихвеществ, которые извлекаются из биологического материала подкисленнойводойили подкисленнымэтиловым спиртом, применяется ряд физических и физико-химических методов. Для этой цели используются методыхроматографии на бумаге, в тонких слоях сорбентов, газожидкостнойхроматографии,спектроскопиив УФ- и ИК-областях,электрофореза, микродиффузии и др. Условия обнаружения отдельных токсическихвеществс помощью перечисленных выше методов описаны в соответствующих разделах этой книги.

Фармакологические (физиологические) пробы. Некоторые ядовитыевеществапри действии наорганизмживотных вызывают характерные физиологические реакции. Так, например,атропин, введенный в глаз кошки, вызывает расширение зрачка. После нанесенияраствораникотинана спинку лягушки она принимает характерную позу. То же касается истрихнина. При нанесении его на спинку лягушки появляются тетанические судо роги, а затем лягушка принимает позу, характерную для действиястрихнина.

Фармакологические испытания ядовитых веществ, выделенных из биологического материала и хорошо очищенных с помощью соответствующих методов, должны выполнять специалисты— фармакологи, имеющие специальные познания в этой области и владеющие техникой эксперимента.