§ 3. Влияние состава извлекающих жидкостей на изолирование алкалоидов и других азотистых основании из биологического материала

Применяемые в химико-токсикологическом анализе методы выделения алкалоидови других азотистых оснований из биологического материала основаны на изолировании этихвеществподкисленнойводойили подкисленнымэтиловым спиртом. Степень изолирования указанныхвеществ, количество и природа примесей, переходящих из биологического материала в вытяжки, зависят от состава извлекающихжидкостей.

К извлекающим жидкостям, применяемым для изолирования ядовитыхвеществиз биологического материала, предъявляется ряд требований. Этижидкостидолжны хорошо проникать вклеткиитканибиологического материала; разрушать связи между ядами и белковымивеществамивтканях; хорошо растворятьсолиядовитыхвеществ, которые образуются в биологическом материале под влиянием кислот, входящих в состав извлекающихжидкостей; растворять как можно меньшие количества примесей, переходящих из биологического материала в вытяжки.

Способность извлекающих жидкостей, применяемых для изолирования ядовитыхвеществ, проникать втканитрупов, подлежащих исследованию н.а наличие ядов, зависит от содержимогоклетокитканейисследуемого биологического материала. Известно, что во внутриклеточнойжидкостисодержится около 50, а во внеклеточной — около 20 %воды. В мышцах находится 75— 78, а в печени — 70—75 %воды. В связи с наличием большого

количества водывклеткахитканяхорганов трупов в этиклеткимогут проникатьводаи смешивающиеся сводойорганическиерастворители. Проникновению в биологический материал органическихрастворителей, несмешивающихся сводой, препятствуетвода, находящаяся вклеткахитканяхорганов трупов. Поэтому органическиерастворители, несмешивающиеся сводой, не пригодны или малопригодны для изолирования токсическихвеществиз органов трупов. Они могут применяться для извлечения физиологически активныхвеществиз высушенного растительного материала и других объектов, содержащих незначительное количество влаги.

На степень изолирования алкалоидови других азотистых соединений основного характера из биологического материала оказывает влияние природа кислоты, применяемой для подкисленияводыиэтилового спирта. В зависимости от природы кислоты, содержащейся в извлекающейжидкости, ядовитыевещества, находящиеся в биологическом материале, превращаются в нем всолиэтой кислоты. Чем лучше растворяютсясолиядовитыхвеществв извлекающейжидкости, тем легче изолируются эти яды из биологического материала. Это можно показать на примереморфина.Ацетатморфинахорошо растворяется вводеΠ : 2,5). Хуже растворяются вводетартрат(1 : 10), затем сульфат (1:21) и гидрохлорид (1 : 40)морфина. Вэтиловом спиртелучше растворяется гидрохлорид иацетатморфина(1 : 100), чем сульфат итартрат(1 : 1000) этогоалкалоида.

Неодинаковой растворимостьюсолейморфинавводеиэтиловом спиртеобъясняется различная степень изолирования этогоалкалоидаиз биологического материала указанными извлекающимижидкостями. При изолированииморфинаводой, подкисленнойсерной кислотой, из биологического материала выделяются большие количества этогоалкалоида, чем при изолировании егоэтиловым спиртом, подкисленным винной илисерной кислотой.

В некоторых источниках литературы указывается на непригодность минеральных кислот для подкисления водыиэтилового спирта, применяемых для изолированияалкалоидовиз биологического материала. Это мотивируется тем, что минеральные кислоты могут разлагатьалкалоиды, являющиесясложными эфирами, а также гидролизовать белковыевещества, содержащиеся в биологическом материале, загрязняя алкалоидные вытяжки продуктамигидролизабелков(пептидами,аминокислотамии др.).

Известно, что при выделении алкалоидови других токсическихвеществиз биологического материала его настаивают с подкисленнойводой(при рН = 2...3) в течение двух-трех часов. Экспериментальныеданныепоказывают, что за такое время не происходитгидролизбиологического материала иалкалоидов, являющихсясложными эфирами. Даже для частичногогидролизабелковтребуются относительно жесткие условия (более высокаяконцентрациякислоты и длительное нагревание). Поэтомурастворыразбавленных минеральных кислот, имеющие рН = 2...3, как ирастворыорганических кислот с таким же рН, могут применяться для изолированияалкалоидов(в том числе и сложных эфиров) из биологического материала.

Возникают определенные затруднения при выборе извлекающей жидкостидля изолированияметаболитовиз биологического материала. Большинство ядовитыхвеществворганизмеподвергается биотрансформации. В результате этого ядовитыевещества, поступившие ворганизм, частично или полностью превращаются в ихметаболиты. Поэтому для установления причин отравлений в ряде случаев необходимо производить обнаружение и количественное определение не только ядовитыхвеществ, но и ихметаболитов.

Растворимостьбольшинства ядовитыхвеществв подкисленнойводеили в подкисленномэтиловом спиртеотличается отрастворимостиихметаболитовв указанных извлекающихжидкостях. Поэтому иногда трудно подобрать извлекающуюжидкость, обеспечивающую совместное изолирование ядовитыхвеществи ихметаболитовиз одной навески биологического материала. В этих случаях ряд авторов рекомендуют производить изолирование ядовитыхвеществи ихметаболитовиз двух навесок биологического материала. Из одной навески изолируют ядовитоевещество, а из другой —метаболиты.